淀粉酶在食品加工及轻工业生产中具有广泛用途。研究人员从细菌中克隆了一种淀粉酶基因，为了获得高产淀粉酶菌株，按如图所示流程进行基因工程操作。
（1）将淀粉酶基因与质粒载体重组时需要使用的酶包括限制酶、DNA连接酶限制酶、DNA连接酶。
（2）大肠杆菌经过氯化钙氯化钙处理后，可作为重组载体的宿主（感受态）细胞使用。
（3）为了初步筛选高产菌株，研究人员将得到的3个工程菌株接种到以淀粉为唯一碳源的培养基上，经过培养后用稀碘液处理，可观察到由于淀粉被分解，在平板上形成以菌落为中心的透明圈。测量不同菌株形成的菌落及透明圈直径，结果见下表。
| 工程菌 | 菌落直径（C，mm） | 透明圈直径（H，mm） | H/C |
| 菌株Ⅰ | 8.1 | 13.0 | 1.6 |
| 菌株Ⅱ | 5.1 | 11.2 | 2.2 |
| 菌株Ⅲ | 9.5 | 17.1 | 1.8 |
细菌的增殖速度
细菌的增殖速度
，透明圈直径（H）的大小反映了细菌分解淀粉的能力
细菌分解淀粉的能力
。②根据表中数据，可推断其中淀粉酶产量最高的菌株是
菌株Ⅱ
菌株Ⅱ
。（4）基因工程技术已成功应用于人类生产生活中的诸多方面。请从植物育种或人类疾病预防与治疗方面举一实例，并说明制备该转基因产品的基本技术流程。（限100字以内）
示例一：转基因抗虫棉。从细菌中克隆Bt蛋白基因，构建重组载体，导入受体棉花细胞后进行组织培养。经对再生植株目的基因的检测，会的转基因棉花。
示例二：基因工程胰岛素。克隆人的胰岛素基因，构建重组载体，转入大肠杆菌后，检测目的基因，筛选高产菌株丙进行培养，生产胰岛素
示例二：基因工程胰岛素。克隆人的胰岛素基因，构建重组载体，转入大肠杆菌后，检测目的基因，筛选高产菌株丙进行培养，生产胰岛素
示例一：转基因抗虫棉。从细菌中克隆Bt蛋白基因，构建重组载体，导入受体棉花细胞后进行组织培养。经对再生植株目的基因的检测，会的转基因棉花。
示例二：基因工程胰岛素。克隆人的胰岛素基因，构建重组载体，转入大肠杆菌后，检测目的基因，筛选高产菌株丙进行培养，生产胰岛素
。示例二：基因工程胰岛素。克隆人的胰岛素基因，构建重组载体，转入大肠杆菌后，检测目的基因，筛选高产菌株丙进行培养，生产胰岛素
【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．
【答案】限制酶、DNA连接酶；氯化钙；细菌的增殖速度；细菌分解淀粉的能力；菌株Ⅱ；示例一：转基因抗虫棉。从细菌中克隆Bt蛋白基因，构建重组载体，导入受体棉花细胞后进行组织培养。经对再生植株目的基因的检测，会的转基因棉花。
示例二：基因工程胰岛素。克隆人的胰岛素基因，构建重组载体，转入大肠杆菌后，检测目的基因，筛选高产菌株丙进行培养，生产胰岛素
示例二：基因工程胰岛素。克隆人的胰岛素基因，构建重组载体，转入大肠杆菌后，检测目的基因，筛选高产菌株丙进行培养，生产胰岛素
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：36引用：2难度：0.6
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1．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
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