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细胞的结构、代谢、遗传等都与蛋白质的结构和功能密切相关,而对蛋白质的研究和应用,首先需要获得高纯度的蛋白质。从红细胞中提取和分离血红蛋白的流程图如图,回答下列问题:

(1)血红蛋白因含有
血红素
血红素
(该物质中含Fe2+)而呈红色,这有利于对提取过程进行监测。
(2)在进行样品处理时首先要使用
生理盐水
生理盐水
,对红细胞进行洗涤,目的是
去除杂蛋白(或血浆蛋白),以便于后续步骤的分离纯化
去除杂蛋白(或血浆蛋白),以便于后续步骤的分离纯化
。在该过程中,若
离心速度过高和时间过长
离心速度过高和时间过长
,则会使白细胞一同沉淀,达不到分离的效果。
(3)流程图中步骤A、B分别是
血红蛋白的释放和粗分离
血红蛋白的释放和粗分离

(4)用凝胶色谱法纯化蛋白质时,分子质量较大的蛋白质
(“先”或“后”)从层析柱中洗脱出来,装填凝胶柱时,色谱柱不能有气泡存在,原因是
气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果
气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果

(5)若要判断提取分离的血红蛋白是否达到要求,需要进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行鉴定,其中的SDS的作用是
SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移速率完全取决于分子的大小
SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移速率完全取决于分子的大小

【答案】血红素;生理盐水;去除杂蛋白(或血浆蛋白),以便于后续步骤的分离纯化;离心速度过高和时间过长;血红蛋白的释放和粗分离;先;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果;SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量,掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别,使电泳迁移速率完全取决于分子的大小
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:3引用:1难度:0.5
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