某研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌，将其添加于饲料中，以提高家禽养殖效益。枯草芽孢杆菌可分泌一种可降解纤维素的酶，这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因，需以图1中质粒为载体将W基因导入乳酸杆菌，图2为含W基因的DNA片段。回答下列问题：
（1）采用PCR技术可以大量扩增W基因，该过程包括将W基因解链（变性）、引物与单链相应互补序列结合引物与单链相应互补序列结合（复性）和在 耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）作用下合成互补子链（延伸）。
（2）不同生物的DNA能够连接的原因是其分子结构相似、基本组成单位相同且均遵循 碱基互补配对碱基互补配对原则。将W基因与图1所示的载体连接前应使用限制酶 EcoRI、HindⅢEcoRI、HindⅢ切割图2中含W基因的DNA片段和载体，相对于单酶切，这种方法的优点是 避免目的基因和载体的自身环化以及反向连接（合理即可）避免目的基因和载体的自身环化以及反向连接（合理即可）。
（3）所得重组质粒转化乳酸杆菌后，使用含 氨苄青霉素氨苄青霉素的培养基筛选，以得到转入W基因的乳酸杆菌。由于载体上的启动子往往具有物种特异性，W基因上游的启动子应选择 乳酸杆菌乳酸杆菌（填“枯草芽孢杆菌”“乳酸杆菌”或“枯草芽孢杆菌或乳酸杆菌”）的启动子。
（4）为确定只有导入重组质粒的乳酸杆菌才具有分解纤维素的能力，研究人员用液体培养基分别培养下表所示菌种，取培养液的上清液测定酶活力，实验方案及测定结果如下表所示，表中的X应为 导入普通质粒的乳酸杆菌导入普通质粒的乳酸杆菌。
| 菌种 | 酶活性相对值 |
| 乳酸杆菌 | 未检出 |
| X | 未检出 |
| 导入了重组质粒的乳酸杆菌 | 0.96 |
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】引物与单链相应互补序列结合；耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）；碱基互补配对；EcoRI、HindⅢ；避免目的基因和载体的自身环化以及反向连接（合理即可）；氨苄青霉素；乳酸杆菌；导入普通质粒的乳酸杆菌
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/4/20 14:35:0组卷：25引用：1难度：0.5
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
