人参中含有多种固醇类化合物，统称为人参皂苷。其中人参皂苷Rg3能有效抗肿瘤血管生成。通过特定的细胞培养可以大量生产人参皂苷Rg3。具体的培养流程如下：首先利用人参组织制备出人参单细胞悬液，再通过植物细胞培养技术获得细胞的次生代谢产物，最后通过分离纯化获得特定产物Rg3。请回答：
（1）制备单细胞悬液。细胞分离有三种方法；其一是直接从外植体分离，包括机械法或酶解法，后者常用

果胶酶

果胶酶

酶处理；其二是愈伤组织诱导法，愈伤组织相对松散，可直接放入

液体培养基

液体培养基

在摇床上进行振荡培养，获得单细胞悬浮液；其三是原生质体再生法，在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液（作用是

维持较高渗透压，保持原生质体稳定

维持较高渗透压，保持原生质体稳定

）中，用纤维素酶和果胶酶处理根尖、叶片、愈伤组织等细胞，获得球形的原生质体，然后在适宜条件下诱导再生出

细胞壁

细胞壁

，获得单个植物细胞。
（2）特定细胞系的培养。上述细胞经过初步培养，选出

能稳定合成人参皂甙

能稳定合成人参皂甙

的细胞，在液体培养基中进行悬浮培养，通过多次

继代

继代

培养，获得大量能合成人参皂甙的细胞系，用于工业化生产。在该培养过程中，能影响人参皂甙产量的因素除培养基因素外，还有哪些因素？

细胞本身特性（基因型），培养时间（或继代培养次数）温度等

细胞本身特性（基因型），培养时间（或继代培养次数）温度等

（列举两项）
（3）Rg3产物分离纯化。用乙醇溶解提取出总皂甙，然后加入硅胶柱，乙醇挥发后，皂甙吸附在胶柱上，然后从胶柱上端加注乙醇进行层析，先后分离出不同类型的皂甙。硅胶层析的方法能从总皂甙中分离出Rg3依据的原理是

不同皂甙对硅胶柱吸附能力不同，随乙醇被分离出来的先后不同

不同皂甙对硅胶柱吸附能力不同，随乙醇被分离出来的先后不同

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