研究发现人溶菌酶（hLZ）是天然抗生素替代品。科学家培育出转入溶菌酶基因山羊，可大规模生产人溶菌酶（从乳汁中提取）。其过程如图所示，其中①～⑨表示过程。亮氨酸是山羊细胞维持生命活动必不可少的一种必需氨基酸，质粒S中的基因Leu通过控制相关酶的合成控制亮氨酸的合成，基因GFP控制合成绿色荧光蛋白。四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请回答下列问题：
| 限制酶 | BamHⅠ | BglⅡ | HindⅢ | XbaⅠ |
| 识别序列和切割位点 | -G↓GATCC- | -A↓GATCT- | -A↓AGCTT- | -T↓CTAGA- |
（1）以胞内的mRNA为模板通过反转录合成cDNA，将其储存于受体菌群，从而构建
cDNA文库（部分基因文库）
cDNA文库（部分基因文库）
。过程②需要的限制酶是 BamHⅠ、HindⅢ
BamHⅠ、HindⅢ
。（2）为成功筛选出含重组质粒T的成纤维细胞，质粒S中用作标记基因的是
基因Leu、基因GFP
基因Leu、基因GFP
。为达到筛选目的，培养基的营养成分中不应含有 亮氨酸
亮氨酸
。将成纤维细胞培养一段时间后观察，筛选出 不显示
不显示
（选填“显示”或“不显示”）绿色荧光的细胞用于过程⑤。（3）过程④常用仪器为
显微注射仪
显微注射仪
。培养过程需对早期胚胎进行性别鉴定和胚胎分割，性别鉴定应取 滋养层
滋养层
（填“滋养层”或“内细胞团”）进行SRY-PCR，筛选出雌性动物胚胎并进行分割，分割时应注意 将内细胞团均等分割
将内细胞团均等分割
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】cDNA文库（部分基因文库）；BamHⅠ、HindⅢ；基因Leu、基因GFP；亮氨酸；不显示；显微注射仪；滋养层；将内细胞团均等分割
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：17引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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