基因X仅在水稻体细胞和精子中表达蛋白X，在卵细胞中不能转录。为研究基因 X表达对水稻卵细胞的影响，进行如下实验：
（1）从水稻体细胞提取基因X的mRNA，首先需破碎细胞，经离心后获得 细胞溶胶细胞溶胶，利用基因X的局部特定短序列做 DNA（基因）探针DNA（基因）探针，从中钓取相应mRNA经 逆转录逆转录后获取目的基因。
（2）将基因X编码序列与Luc基因（荧光素酶基因，荧光素酶能催化荧光素产生荧光）拼接成X-Luc融合基因（表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能），并将融合基因插入到 Ti质粒Ti质粒的T-DNA中，利用 农杆菌转化农杆菌转化法将融合基因转入水稻愈伤组织。
（3）经修饰处理的T-DNA上 启动子（启动部位）启动子（启动部位）可与卵细胞RNA聚合酶结合，从而在转基因水稻卵细胞中能表达基因X。分离并培养转基因水稻卵细胞，添加 荧光素荧光素即可筛选出成功表达基因X的卵细胞。
（4）水稻卵细胞在未受精时一般不进行发育，从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，表明基因 X对水稻卵细胞的影响可能是 X基因表达能使卵细胞不经受精直接发育成胚X基因表达能使卵细胞不经受精直接发育成胚。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】细胞溶胶；DNA（基因）探针；逆转录；Ti质粒；农杆菌转化；启动子（启动部位）；荧光素；X基因表达能使卵细胞不经受精直接发育成胚
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：3引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
