传统影像学诊断在发现转移瘤形成时往往已延误最佳治疗时机。目前可通过液体活检来检查血液中的循环肿瘤细胞(CTCs),用以诊断是否存在癌症转移,步骤如下:注:上皮组织细胞来源的CTCs与正常白细胞表面蛋白质的一些差异(如表)
表 细胞表面抗原标志物表达差异
蛋白种类 细胞类型 |
CD45 | EpCAM |
白细胞 | 有 | 无 |
CTCs | 无 | 有 |

(1)制备单克隆抗体:首先用CD45蛋白对小鼠进行免疫,然后经过如图的①、②、③、④等步骤,获得大量单克隆抗体A;再用EpCAM免疫小鼠,经过相同步骤获得单克隆抗体B。
步骤①涉及到的细胞工程技术主要有
动物细胞融合
动物细胞融合
和 动物细胞培养
动物细胞培养
。步骤②通常使用选择培养基,主要目的是筛选出
杂交瘤细胞
杂交瘤细胞
。步骤③主要需要经过和抗体检测,并经多次筛选,最终获得
产生特定抗体的杂交瘤细胞
产生特定抗体的杂交瘤细胞
。步骤④是大规模培养,主要方法有:
体内培养
体内培养
和 体外培养
体外培养
。体外培养到一定时期的单克隆杂交瘤细胞会因为 细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等
细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等
(至少答出两点)而分裂受阻,需进行传代培养。(2)利用免疫磁珠进行分离:取待测人员少量血液于采集管内,将连接有单克隆抗体
A
A
(填“A”或“B”)的磁珠加入采集管,外加磁场使磁珠定向移动到指定区域并取出,这样可以排除非肿瘤细胞的干扰;再将连接有单克隆抗体 B
B
(填“A”或“B”)的磁珠加入采集管,外加磁场使磁珠定向移动到指定区域取出,收集CTCs。(3)计数并诊断:若出现
CTCs阳性
CTCs阳性
(细胞)数量超出正常范围,即可诊断发生癌细胞转移。【考点】单克隆抗体及其应用.
【答案】动物细胞融合;动物细胞培养;杂交瘤细胞;产生特定抗体的杂交瘤细胞;体内培养;体外培养;细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等;A;B;CTCs阳性
【解答】
【点评】
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