大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列，位于该质粒的lacZ基因中，lacZ基因中如果没有插入外源基因，lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落；如果lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶，培养基中的X-gal不会被水解成蓝色，大肠杆菌将形成白色菌落．pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因．左图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图．据图回答下列问题：
（1）人体DNA的目的基因中不能不能（能或不能）含有大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列．
（2）作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因（或对氨苄青霉素敏感）不含氨苄青霉素抗性基因（或对氨苄青霉素敏感），以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌．为了增加导入成功率，取用Ca2+Ca2+溶液处理（可增加细菌细胞壁细胞壁的通透性）过的受体大肠杆菌，置于试管Ⅱ中，并加入在试管Ⅰ中制备好的DNA在试管Ⅰ中制备好的DNA．
（3）图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入IPTG、X-gal、氨苄青霉素IPTG、X-gal、氨苄青霉素等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌．
（4）将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养，以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒，请预测菌落的颜色，并分析结果：
①如果长出蓝色菌落，说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入运载体（或说明重组质粒没导入受体大肠杆菌）如果长出蓝色菌落，说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入运载体（或说明重组质粒没导入受体大肠杆菌）
②如果长出白色菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌如果长出白色菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌．
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】不能；不含氨苄青霉素抗性基因（或对氨苄青霉素敏感）；Ca2+；细胞壁；在试管Ⅰ中制备好的DNA；IPTG、X-gal、氨苄青霉素；如果长出蓝色菌落，说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体菌，但目的基因没有接入运载体（或说明重组质粒没导入受体大肠杆菌）；如果长出白色菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：9引用：1难度：0.5
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