基因工程
长期高血糖可引发血管细胞衰老。科研人员为研究S蛋白在因高血糖引发的血管细胞衰老中的作用，以腺病毒为载体将编码S蛋白的S基因导入血管细胞，实现S蛋白在血管细胞中的大量表达。腺病毒的遗传物质为DNA，其复制需要E1、E2、E3基因共同完成。为将S基因导入腺病毒，科研人员首先构建了含S基因的重组质粒，过程如图1，含S基因重组腺病毒的制作过程如图2。
（1）科研人员将S基因先用 BamH I和EcoR IBamH I和EcoR I（填限制酶的名称）酶切后，再用DNA连接酶连入质粒1，得到重组质粒Ⅰ（图1甲所示），导入细菌后。为筛选含有重组质粒Ⅰ的细菌，除了营养成分外，培养基还需添加 ADAD。（多选）
A.卡那霉素
B.氨苄霉素
C.DNA连接酶
D.琼脂
（2）在上述培养基中长出的单菌落提取质粒，无法确定是否含有S基因，原因是 含有质粒I的细菌具有卡那霉素抗性，能在含卡那霉素的培养基中生存含有质粒I的细菌具有卡那霉素抗性，能在含卡那霉素的培养基中生存。如要进一步鉴定重组质粒Ⅰ是否含有S基因，下列方法可选用的是 ②②。
①测定重组质粒Ⅰ的长度②测定重组质粒Ⅰ碱基序列③放在青霉素培养基进行筛选④测定重组质粒Ⅰ的元素
（3）重组质粒Ⅰ长度为3.5kb（千碱基对），质粒Ⅱ长度为5.4kb,用限制酶切重组质粒Ⅰ获得DNA片段，利用pmeⅠ切割将此DNA片段与质粒Ⅱ（图1乙所示）重组产生重组质粒Ⅱ，重组质粒Ⅱ的长度可能为 6.2kb6.2kb，原因是 重组质粒I中只有一个Pme I切割位点，质粒Ⅱ中有两个Pme I切割位点，且这两个位点大约将质粒Ⅱ平均分成两部分，形成的重组质粒Ⅱ的长度约为3.5+5.42=6.2kb重组质粒I中只有一个Pme I切割位点，质粒Ⅱ中有两个Pme I切割位点，且这两个位点大约将质粒Ⅱ平均分成两部分，形成的重组质粒Ⅱ的长度约为3.5+5.42=6.2kb。
（4）图2中，将含S基因的重组质粒Ⅱ，用PacⅠ酶切后，获得改造后的腺病毒DNA，将其导入A细胞的目的是 复制并指导腺病毒外壳蛋白的合成，产生大量重组腺病毒复制并指导腺病毒外壳蛋白的合成，产生大量重组腺病毒，A细胞的基因必须要含有 E3E3基因。
（5）综合上述信息，从生物安全性角度分析重组腺病毒载体的优点：重组腺病毒只有在A细胞中才能够复制，即使侵染其他细胞，也不能复制；重组腺病毒进入宿主细胞后不整合到宿主细胞染色体上；腺病毒是人工改造的载体，不含致病基因重组腺病毒只有在A细胞中才能够复制，即使侵染其他细胞，也不能复制；重组腺病毒进入宿主细胞后不整合到宿主细胞染色体上；腺病毒是人工改造的载体，不含致病基因。
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【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】BamH I和EcoR I；AD；含有质粒I的细菌具有卡那霉素抗性，能在含卡那霉素的培养基中生存；②；6.2kb；重组质粒I中只有一个Pme I切割位点，质粒Ⅱ中有两个Pme I切割位点，且这两个位点大约将质粒Ⅱ平均分成两部分，形成的重组质粒Ⅱ的长度约为3.5+=6.2kb；复制并指导腺病毒外壳蛋白的合成，产生大量重组腺病毒；E3；重组腺病毒只有在A细胞中才能够复制，即使侵染其他细胞，也不能复制；重组腺病毒进入宿主细胞后不整合到宿主细胞染色体上；腺病毒是人工改造的载体，不含致病基因
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【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：16引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
