为探究细菌间的相互作用,科研人员利用基因工程技术,对无法利用乳糖的大肠杆菌进行改造。
(1)将乳糖酶基因转入大肠杆菌,获得营养菌(能利用乳糖);将抗生素CRO降解酶基因转入大肠杆菌,获得抗性菌。已知乳糖酶基因来自真核生物,则该基因可以从cDNAcDNA(基因组/cDNA/基因组或cDNA)文库中获得,理由是cDNA文库中没有内含子,大肠杆菌是原核生物,其基因结构与cDNA结构更接近cDNA文库中没有内含子,大肠杆菌是原核生物,其基因结构与cDNA结构更接近。
利用PCR技术对乳糖酶基因进行扩增,需加入热稳定DNA聚合酶和引物,加入引物的原因是DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3’端延伸DNA链DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3’端延伸DNA链。反应体系中加入dATP、dTTP、dCTP和dGTP代替四种脱氧核苷酸,这是因为dATP、dTTP、dCTP和dGTP的作用是提供反应所需的原料和能量提供反应所需的原料和能量。
(2)将两种菌分别用无菌水无菌水进行一系列梯度稀释,然后用涂布法单独接种于加入含CRO并以乳糖为唯一碳源的培养基中,培养一段时间后,培养皿中均未出现菌落,推测两种菌未发生未发生(填“发生”或“未发生”)可遗传变异。
(3)将种菌混合接种,培养一段时间后,培养皿中有菌落长出,且同时含有两种细菌。为进一步探究上述现象的原因,科研人员设计了图所示装置进行实验。
在接种了营养菌和抗性菌混合菌液的培养板左侧,加入含CRO并以乳糖为唯一碳源的培养基,培养基可从左侧逐渐扩散到混合菌液培养板上。培养一段时间后发现,营养菌和抗性菌的变化趋势是二者均显著增加并逐渐向近培养基端(相对距离0的方向)增殖,分析其原因是抗性菌增殖,降解了CRO,使营养菌能存活并增殖;营养菌增殖,分解乳糖,代谢产物为抗性菌生长提供碳源抗性菌增殖,降解了CRO,使营养菌能存活并增殖;营养菌增殖,分解乳糖,代谢产物为抗性菌生长提供碳源。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】cDNA;cDNA文库中没有内含子,大肠杆菌是原核生物,其基因结构与cDNA结构更接近;DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3’端延伸DNA链;提供反应所需的原料和能量;无菌水;未发生;抗性菌增殖,降解了CRO,使营养菌能存活并增殖;营养菌增殖,分解乳糖,代谢产物为抗性菌生长提供碳源
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:9引用:1难度:0.7
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