普通棉花中含β甘露糖苷酶基因（GhMmaA2），能在纤维细胞中特异性表达，产生的β甘露糖苷酶催化半纤维素降解，棉纤维长度变短。为了培育新的棉花品种，科研人员构建了反义GhMnaA2基因表达载体，利用农杆菌转化法导入棉花细胞，成功获得转基因棉花品种，具体过程如图。请分析回答：
（1）纤维细胞E6启动子基本组成单位为 4种脱氧核苷酸4种脱氧核苷酸，基因表达载体除了图示组成外，至少还有 复制原点、终止子、标记基因复制原点、终止子、标记基因等（至少答两个），构建基因载体的目的是使目的基因稳定存在并且可以遗传在下一代，使目的基因能够 表达和发挥作用表达和发挥作用。
（2）PCR技术扩增β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）原理是 DNA复制DNA复制，该过程除需要根据 GhMnaA2两端部分核苷酸序列GhMnaA2两端部分核苷酸序列设计特异性引物序列处为保证GhMnaA2能插入到质粒2中，还需要在引物的 5′5′端添加限制酶识别序列。
（3）为什么不能用GhMnaA2探针进行DNA分子杂交来鉴定基因表达载体是否导入棉花细胞？因为棉花细胞中本来就有GhMna2，不管是否导入都能与该探针发生碱基互补配对因为棉花细胞中本来就有GhMna2，不管是否导入都能与该探针发生碱基互补配对。
（4）③过程中用酶切法可鉴定正、反义表达载体。用SmaI酶和NotI酶切割正义基因表达载体获得0.05kb、3.25kb、5.95kb、8.45kb四种长度的DNA片段，则用NotI酶切反义基因表达载体获得DNA片段的长度应是 6.0kb6.0kb和 11.7kb11.7kb。
（5）导入细胞内的反义GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纤维更长原理是 反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达（翻译）反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达（翻译）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】4种脱氧核苷酸；复制原点、终止子、标记基因；表达和发挥作用；DNA复制；GhMnaA2两端部分核苷酸序列；5′；因为棉花细胞中本来就有GhMna2，不管是否导入都能与该探针发生碱基互补配对；6.0kb；11.7kb；反义GhMnaA2转录的mRNA能与棉花细胞内的GhMnaA2转录的mRNA互补配对，从而抑制基因的表达（翻译）
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：34引用：3难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
