维生素A在体内转化为11-顺式视黄醛后，与视网膜特定细胞中的视蛋白结合成视紫红质。视紫红质接受光信号后，11-顺式视黄醛转变为全反式视黄醛，视紫红质构象发生变化，激活细胞内的信号通路，最终产生视觉。全反式视黄醛与视蛋白脱离，经复杂的转运和酶促反应，再度转变为11-顺式视黄醛而被重复利用。最新研究表明，一种G蛋白偶联受体RGR可能参与了视觉产生的某些过程。为研究RGR的作用机理，某研究小组利用基因工程培育出含RGR反义基因（反义基因是通过原基因反向连接在载体的启动子和终止子之间，其转录出的mRNA与原基因转录出的mRNA互补配对）的转基因小鼠（rgr），研究该基因的功能。回答下列问题：
（1）为构建RGR反义基因重组载体，需先设计引物，通过PCR技术特异性扩增RGR基因。为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，即在引物A添加 BamHIBamHI限制酶识别序列，在引物B添加 EcoRIEcoRI限制酶识别序列。引物的化学本质一般是 DNADNA。
（2）培养转基因小鼠过程中，将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是 显微注射法显微注射法，常用的受体细胞是 受精卵受精卵选择培养基中除有动物细胞培养的必需成分，还需要添加 四环素四环素起筛选作用。
（3）研究人员将正常小鼠（WT）和转基因小鼠（rgr）都平均分成两组，一组在黑暗中饲养12h,另一组在光照下饲养12h；随后测定小鼠眼睛中11-顺式视黄醛、全反式视黄醛和视紫红质的含量，结果如图3所示。据图分析，光照条件下RGR的作用机理可能是 RGR通过促进全反式视黄醛转化为11-顺式视黄醛，进而增加视紫红质的形成RGR通过促进全反式视黄醛转化为11-顺式视黄醛，进而增加视紫红质的形成。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】BamHI；EcoRI；DNA；显微注射法；受精卵；四环素；RGR通过促进全反式视黄醛转化为11-顺式视黄醛，进而增加视紫红质的形成
【解答】
【点评】
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发布：2024/11/22 9:30:1组卷：15引用：2难度：0.5
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
