萤火虫发光是体内荧光素酶催化一系列反应所产生的现象。如果荧光素酶存在于植物体内,也可使植物体发光。一直以来荧光素酶的惟一来源是从萤火虫腹部提取。但加利福尼亚大学的一组科学家成功地通过转基因工程实现了将荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内,并在大肠杆菌体内产生荧光素酶。请你根据已有的知识回答下列有关问题:
(1)在此转基因工程中,目的基因是 荧光素酶基因荧光素酶基因,将目的基因和质粒“缝合”在一起的工具酶是 DNA连接酶DNA连接酶。该酶据来源可以分为两类,其中 T4-DNA连接酶T4-DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端,又可以“缝合”平末端。
(2)将此目的基因导入到大肠杆菌体内需要载体的帮助。选取载体时必须考虑的条件是 能够在宿主细胞内复制并稳定保存、具有特定的限制酶切割位点、具有与目的基因相同的碱基片段、具有某些标记基因能够在宿主细胞内复制并稳定保存、具有特定的限制酶切割位点、具有与目的基因相同的碱基片段、具有某些标记基因。(至少写出两点)。
(3)在此基因工程中,将体外重组DNA导入大肠杆菌体内,并使其在细胞内稳定保存和表达的过程称为 转化转化。最常用的方法是首先用 Ca2+Ca2+处理大肠杆菌得到 感受态感受态细胞。
(4)目的基因是否导入受体细胞,用 DNA分子杂交DNA分子杂交技术来检测。目的基因是否表达出相应的蛋白质,除了通过大肠杆菌是否发光来确定外,还可以通过 抗原—抗体抗原—抗体特异性反应来判断。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】荧光素酶基因;DNA连接酶;T4-DNA连接酶;能够在宿主细胞内复制并稳定保存、具有特定的限制酶切割位点、具有与目的基因相同的碱基片段、具有某些标记基因;转化;Ca2+;感受态;DNA分子杂交;抗原—抗体
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:8引用:2难度:0.7
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