新冠病毒是一种RNA病毒，其主要通过其表面刺突蛋白（S蛋白）与人体细胞上的“血管紧张素转化酶2（ACE2）”受体结合实现感染。各类新冠病毒疫苗的研发都是基于这个主要的理论基础，即以S蛋白基因为靶点，通过表达S蛋白，诱导人体产生免疫能力，从而实现预防感染的目的。以下是两条疫苗研究技术路线：
A.疫苗研究技术路线1：体外表达疫苗--重组疫苗。
提取新冠病毒RNA，获取S蛋白基因，构建S蛋白基因表达载体，导入酿酒酵母，合成并分泌S蛋白质（疫苗），注射人体，产生免疫。
B.疫苗研究技术路线2：体内表达疫苗--病毒载体疫苗。
提取新冠病毒RNA，获取S蛋白基因，将 S蛋白基因转入复制缺陷型腺病毒的基因组内，获得疫苗。接种该疫苗后，腺病毒载体会进入人体细胞，由于基因缺陷，腺病毒本身无法复制，但其内的S蛋白基因会启动产生S蛋白，这种S蛋白会从细胞内转移到细胞外，诱导人体产生免疫。
据上述材料结合所学知识，回答下列问题：
（1）两条技术路线中，获取S蛋白基因的方法是：提取病毒RNA，通过

逆转录

逆转录

 过程合成S蛋白基因，再用PCR技术扩增S蛋白基因。设计扩增S蛋白基因所需的引物时，不可以将一端引物设计为含GAATTC序列，理由是：

引物会与自身碱基互补配对，无法与模板链结合（引物与引物之间也可以形成双链，引物会与自身碱基互补配对，降低引物与模板间结合的效率）

引物会与自身碱基互补配对，无法与模板链结合（引物与引物之间也可以形成双链，引物会与自身碱基互补配对，降低引物与模板间结合的效率）

。
（2）技术路线1中，常使用两种酶切割载体。这里的酶是

限制性核酸内切酶

限制性核酸内切酶

；与单酶切相比，优点是：

避免目的基因与质粒（运载体）的反向链接物，或者目的基因自身连接物与质粒自身连接物

避免目的基因与质粒（运载体）的反向链接物，或者目的基因自身连接物与质粒自身连接物

。体外表达技术在疫苗领域已经非常成熟，但由于S蛋白中含有受体酵母菌自身分泌的内源蛋白，所以

提纯

提纯

比较复杂；
（3）技术路线2中，相当于把人体细胞当作了疫苗工厂，大大简化了疫苗生产过程。无法自我复制的腺病毒也会被人体免疫机制清理掉，提高了疫苗的

安全性

安全性

。但是绝大多数人成长过程中曾感染过腺病毒，短期内体内可能存在能中和腺病毒载体的

抗体

抗体

，从而

降低

降低

（用“加强/降低”作答）疫苗效果，这就是预存免疫。