遗传毒性物质常存在于被化学物质污染的水体，可损伤生物的DNA，严重威胁人类健康。研究人员通过基因工程改造大肠杆菌，以期筛选对遗传毒性物质反应灵敏的工程菌株，用于水质检测。
（1）大肠杆菌DNA中存在可被遗传毒性物质激活的毒性响应启动子序列。将毒性响应启动子插入图1所示表达载体的P区，获得基因工程改造的大肠杆菌。当改造后的大肠杆菌遇到遗传毒性物质时，RNA聚合酶RNA聚合酶识别并与启动子结合，驱动噬菌体裂解基因（SRR） 转录转录，表达产物可使大肠杆菌裂解。
（2）研究人员选取启动子sul准备与图1表达载体连接。图2显示了启动子sul内部存在的酶切位点，箭头表示转录方向。
①据图1、2信息，克隆启动子sul时，在其A端和B端应分别添加限制性内切酶 XhoⅠ和SapⅠXhoⅠ和SapⅠ的酶切位点，从而确保启动子sul可与已被酶切的表达载体正确连接。
②将重组表达载体导入大肠杆菌，置于含有 氨苄青霉素氨苄青霉素的选择培养基中进行筛选、鉴定及扩大培养，获得工程菌sul。
（3）研究人员陆续克隆了其他4种启动子（rec、imu、qnr、cda），分别连入表达载体，用同样的方法获得导入重组载体的工程菌，以筛选最灵敏的检测菌株。
①将5种工程菌和对照菌在LB培养基中培养一段时间后，检测菌体密度，结果如图3。图中结果显示 5种工程菌菌体数量增长趋势与对照菌一致5种工程菌菌体数量增长趋势与对照菌一致，说明工程菌在自然生长状态下不会产生自裂解现象。
②上述菌株在LB培养基中生长2h时加入遗传毒性物质，检测结果如图4。据图可知，5种工程菌均启动了对遗传毒性物质的响应，应选择工程菌 转入rec启动子的菌株转入rec启动子的菌株作为最优检测菌株。
（4）下列关于该工程菌的叙述，正确的包括 ADAD。
A.该工程菌可能用于检测土壤、蔬菜中的农药残留量
B.该毒性响应启动子序列广泛存在于自然界所有物种中
C.其表达产物可裂解大肠杆菌，检测后的剩余菌液可直接倒掉
D.为长期保存该工程菌，应加入一定浓度的甘油冻存于-20℃
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】RNA聚合酶；转录；XhoⅠ和SapⅠ；氨苄青霉素；5种工程菌菌体数量增长趋势与对照菌一致；转入rec启动子的菌株；AD
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：122引用：9难度：0.6
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