蓝舌病是由蓝舌病病毒（BTV）引起的感染牛、羊等家畜的烈性传染病。BTV病毒的核酸由双链RNA构成，可编码7种结构蛋白和5种非结构蛋白（只在被感染的细胞中表达）。研究人员将编码病毒的这些蛋白基因导入图1所示pUC18质粒中，用于制备相关疫苗的研究。请据图和所学知识回答问题：
注：图1为pUC18质粒（2.7kb），图2为质粒B（2.7kb），EcoRⅠ（0.6kb）、PvuⅠ（0.8kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。已知1kb=1000个碱基对。
（1）pUC18质粒为环状DNA分子，为了能成功构建重组DNA分子，需要先通过 逆转录逆转录的方法获得目的基因，再用 PCRPCR技术扩增。在建立基因文库的过程中须将含有目的基因的质粒导入 受体菌受体菌中储存。
（2）基因工程的核心步骤是构建基因表达载体构建基因表达载体。将图1的目的基因和图2所示质粒连接后，得到图3中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用限制酶 EcoRⅠEcoRⅠ对重组质粒完全酶切后进行电泳分析，若是正向连接载体，结果会出现长度为 1.21.2Kb和 5.55.5Kb两种DNA分子。
（3）重组病毒载体疫苗是以减毒病毒为载体，将抗原蛋白基因导入动物细胞并表达，进而引发免疫反应。研究人员在制备BTV重组病毒载体疫苗时不选用编码 非结构蛋白非结构蛋白（结构蛋白/非结构蛋白）的基因作抗原基因，理由是 这些病毒蛋白仅存在于被感染的细胞中，不存在于病毒颗粒中这些病毒蛋白仅存在于被感染的细胞中，不存在于病毒颗粒中。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录；PCR；受体菌；构建基因表达载体；EcoRⅠ；1.2；5.5；非结构蛋白；这些病毒蛋白仅存在于被感染的细胞中，不存在于病毒颗粒中
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：13引用：1难度：0.7
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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