如图是利用工程菌（大肠杆菌）生产人生长激素的实验流程。所用的pBR322质粒含有限制酶PstⅠ、EcoR工和HindⅢ的切点各一个，且三种酶切割形成的末端各不相同，而Amp'表示氨苄青霉素抗性基因，Tet'表示四环素抗性基因。请回答以下相关问题。
（1）目的基因主要是指编码蛋白质的基因，也可以是一些具有调控作用调控作用的因子。过程①所用到的组织细胞是人垂体组织细胞人垂体组织细胞，③过程的目的是将平末端处理为黏性末端将平末端处理为黏性末端，⑤过程常用CaCl2CaCl2溶液处理大肠杆菌。
（2）如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对图中质粒进行切割，形成的DNA片段种类有99种，这些种类的DNA片段中含有完整氨苄青霉素抗性基因的DNA片段和四环素抗性基因的DNA片段分别有33种和33种。
（3）如果只用限制酶 PstⅠ切割 目的基因和质粒。完成过程（4）、（⑤）后（受体大肠杆菌不含Amp'、Tet'），将三角瓶内的大肠杆菌先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取培养基甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图乙、丙所示。接种到甲培养基上的目的是筛选含四环素抗性基因含四环素抗性基因的大肠杆菌；接种到培养基乙上的大肠杆菌菌落，能存活的大肠杆菌体内导入的是完整的pBR322质粒（或含有Ampr、Tetr的质粒）完整的pBR322质粒（或含有Ampr、Tetr的质粒）。含有目的基因的大肠杆菌在培养基乙和丙上的生存情况是在丙中能存活，在乙中不能存活在丙中能存活，在乙中不能存活。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】调控作用；人垂体组织细胞；将平末端处理为黏性末端；CaCl2；9；3；3；含四环素抗性基因；完整的pBR322质粒（或含有Ampr、Tetr的质粒）；在丙中能存活，在乙中不能存活
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：35引用：2难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
