研究人员利用鱼类肠道菌株MA35提取纤维素酶,按照“纤维素酶制备→纤维素酶纯化和鉴定→纤维素酶活力检测→纤维素酶酶学性质研究”的思路开展研究。回答下列问题:
(1)从鱼类肠道中提取菌体后接种到 液体培养基液体培养基中进行发酵培养,发酵完毕后将菌体与发酵液分离,菌体再加入缓冲液重新悬浮,利用超声波破碎细胞。制备纤维素粗酶液的思路是 将发酵液和细菌破碎液进行离心分离将发酵液和细菌破碎液进行离心分离。
(2)对获得的纤维素粗酶液用凝胶色谱柱进行洗脱,该方法纯化纤维素酶的原理是 不同质量的蛋白质在凝胶中的移动路线长短和移动的速度不同不同质量的蛋白质在凝胶中的移动路线长短和移动的速度不同。纯化后的纤维素酶使用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法进行纯度鉴定。
(3)测定酶活力时,需要以 煮沸灭菌煮沸灭菌的酶液作为对照组。实验组酶液加入羧甲基纤维素钠溶液,反应30 min后终止反应,以每分钟释放1 mmol 葡萄糖葡萄糖所需要的酶量作为1个酶活力单位。设置30~80℃,pH为3.0~10.0的条件进行纤维素酶酶学性质研究,主要目的是 探究纤维素酶的最适温度和最适pH探究纤维素酶的最适温度和最适pH。
【答案】液体培养基;将发酵液和细菌破碎液进行离心分离;不同质量的蛋白质在凝胶中的移动路线长短和移动的速度不同;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;煮沸灭菌;葡萄糖;探究纤维素酶的最适温度和最适pH
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:30引用:4难度:0.7
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