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研究人员利用鱼类肠道菌株MA35提取纤维素酶,按照“纤维素酶制备→纤维素酶纯化和鉴定→纤维素酶活力检测→纤维素酶酶学性质研究”的思路开展研究。回答下列问题:
(1)从鱼类肠道中提取菌体后接种到
液体培养基
液体培养基
中进行发酵培养,发酵完毕后将菌体与发酵液分离,菌体再加入缓冲液重新悬浮,利用超声波破碎细胞。制备纤维素粗酶液的思路是
将发酵液和细菌破碎液进行离心分离
将发酵液和细菌破碎液进行离心分离

(2)对获得的纤维素粗酶液用凝胶色谱柱进行洗脱,该方法纯化纤维素酶的原理是
不同质量的蛋白质在凝胶中的移动路线长短和移动的速度不同
不同质量的蛋白质在凝胶中的移动路线长短和移动的速度不同
。纯化后的纤维素酶使用
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
的方法进行纯度鉴定。
(3)测定酶活力时,需要以
煮沸灭菌
煮沸灭菌
的酶液作为对照组。实验组酶液加入羧甲基纤维素钠溶液,反应30 min后终止反应,以每分钟释放1 mmol
葡萄糖
葡萄糖
所需要的酶量作为1个酶活力单位。设置30~80℃,pH为3.0~10.0的条件进行纤维素酶酶学性质研究,主要目的是
探究纤维素酶的最适温度和最适pH
探究纤维素酶的最适温度和最适pH

【答案】液体培养基;将发酵液和细菌破碎液进行离心分离;不同质量的蛋白质在凝胶中的移动路线长短和移动的速度不同;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;煮沸灭菌;葡萄糖;探究纤维素酶的最适温度和最适pH
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:30引用:4难度:0.7
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