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小麦纯合自交系川农16具有穗大、粒多、抗病等优良特性,可通过导入抗除草剂基因bar使其获得抗除草剂性状,具体技术路线如图1所示。其中抗除草剂基因bar来源于野生型植物甲,抗草甘膦基因aroA是选择标记基因,报告基因能在特定情况特定组织中表达。
(1)图1中构建表达载体的过程需要用两种不同的限制酶切割,比用一种限制酶切割的优点是
防止目的基因末端任意链接、防止目的基因自身环化、防止目的基因反向连接
防止目的基因末端任意链接、防止目的基因自身环化、防止目的基因反向连接
。很多启动子具有物种特异性,在图中Ti质粒的T-DNA中插入除草剂抗性基因bar时其上游启动子应该选择
C
C

A.野生植物甲启动子
B.农杆菌启动子
C.小麦川农16的启动子
(2)农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选已转化的愈伤组织,需使用含
除草剂
除草剂
的选择培养基。但在转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是
②④
②④
(多选)。
①无农杆菌附着的未转化愈伤组织
②无农杆菌附着的转化愈伤组织
③农杆菌附着的未转化愈伤组织
④农杆菌附着的转化愈伤组织
(3)转化后经筛选的愈伤组织需转换培养基继续培养,此时培养基需添加的植物激素为
生长素、细胞分裂素
生长素、细胞分裂素
,部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是
植物细胞具有全能性,芽顶端合成的生长素向基部运输,促进根的分化
植物细胞具有全能性,芽顶端合成的生长素向基部运输,促进根的分化
。培养获得的转基因植株不一定稳定遗传,须将转基因植株进行
自交
自交
,继续筛选,最终选育出抗除草剂纯合系。
(4)T-DNA序列可随机插入到愈伤组织DNA中导致插入位点基因功能丧失。上述实验中偶然获得了一个突变体F,产量明显低于小麦川农16。研究者用某种限制酶处理突变体F的DNA,得到图2,若以此为模板进行PCR扩增出T-DNA插入位置两侧的未知序列,需选择的引物是
①④
①④

【答案】防止目的基因末端任意链接、防止目的基因自身环化、防止目的基因反向连接;C;除草剂;②④;生长素、细胞分裂素;植物细胞具有全能性,芽顶端合成的生长素向基部运输,促进根的分化;自交;①④
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:32引用:1难度:0.6
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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