让番茄不再在寒风中瑟瑟发抖
生活在寒温带的“美洲叔蝶”冷水鱼，能产生大量的抗冻蛋白。科研人员利用其抗冻基因，培育出抗冻番茄植株，幼苗在哈尔滨的致死温度下降2度。其研发技术路线如图（其中amp'为氨苄青霉素抗性基因）。
（1）按受体细胞分，此案例属于 植物植物基因工程。
小柴查阅相关资料，决定采用SmaⅠ和PstⅠ两种限制酶切割获得抗冻基因和切开质粒，以期在步骤①高效获得重组质粒。
（2）小柴查阅到的资料是：SmaⅠ和PstⅠ两种限制酶切割DNA片段后获得的黏性末端不同（或不互补）SmaⅠ和PstⅠ两种限制酶切割DNA片段后获得的黏性末端不同（或不互补）；此种获得目的基因的方法称为 直接从体细胞中分离直接从体细胞中分离。
小柴用上题方法获得含抗冻基因的重组质粒后，进行如下实验切割原质粒和重组质粒，获得片段大小如表（1kb=1000bp） （注意：DNA 片段大小与图中所画比例一致）
| 限制酶 | AluⅠ | SmaⅠ和PstⅠ |
| 原质粒 | 7.7kb | 2.3kb、5.4kb |
| 重组质粒 | 3.0kb、4.8kb |
2.4kb
2.4kb
，若不考虑终止密码子，抗冻蛋白由 800
800
个 氨基酸组成。（4）步骤②为
重组质粒（重组DNA）导入受体细胞
重组质粒（重组DNA）导入受体细胞
，导入前番茄细胞应具有的特点是 D
D
。A．无amp'，有抗冻基因
B．有amp'，有抗冻基因
C．有amp'，无抗冻基因
D．无amp'，无抗冻基因
（5）步骤③表示植物组织培养的
脱分化和再分化
脱分化和再分化
过程。（6）若抗冻基因整合进二倍体番茄细胞的某一条染色体上（基因型记为Aa）则以下对抗冻番茄进行处理后获得的后代一定保留有抗冻基因的是
AB
AB
。A.营养繁殖
B.植物组织培养
C.自交
D.与普通番茄（aa）杂交
【考点】植物的组织培养．
【答案】植物；SmaⅠ和PstⅠ两种限制酶切割DNA片段后获得的黏性末端不同（或不互补）；直接从体细胞中分离；2.4kb；800；重组质粒（重组DNA）导入受体细胞；D；脱分化和再分化；AB
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：30引用：2难度：0.5
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