用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。
回答下列问题：
（1）常用的DNA链接酶有E.coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。如图中 EcoRⅠ、PstⅠEcoRⅠ、PstⅠ酶切割后的DNA片段可以用E.coli DNA连接酶连接。如图中 EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤEcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。
（2）DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形成的化学键是 磷酸二酯键磷酸二酯键。
（3）DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能 自我复制、稳定存在自我复制、稳定存在；质粒DNA分子上有 一个至多个限制酶切点一个至多个限制酶切点便于外源DNA插入；质粒DNA分子上有标记基因（如某种抗生素抗性基因）。利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是 用含该抗生素的培养基培养宿主细胞用含该抗生素的培养基培养宿主细胞。
（4）表达载体含有启动子，启动子是指 转录开始的地方，RNA聚合酶识别和结合的位点转录开始的地方，RNA聚合酶识别和结合的位点。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】EcoRⅠ、PstⅠ；EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅤ；磷酸二酯键；自我复制、稳定存在；一个至多个限制酶切点；用含该抗生素的培养基培养宿主细胞；转录开始的地方，RNA聚合酶识别和结合的位点
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：635引用：8难度：0.6
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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