科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图一：
（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的细胞核细胞核，供核的细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是十代以内的细胞能保持正常的二倍体核型十代以内的细胞能保持正常的二倍体核型。
（2）获取ES细胞的来源有早期胚胎或原始性腺早期胚胎或原始性腺。
（3）步骤③中，需要构建含有干扰素基因的基因表达载体基因表达载体。构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从如图二A、B、C、D四种单链DNA片段中选取B和CB和C作为引物。对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶的组合为HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ。
（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发绿绿色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，可以采用抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交的方法。
（5）科学家正在通过蛋白质工程技术将干扰素分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可以在不影响其活性的前提下延长其保存周期。这项技术是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础而进行的操作。
【考点】干细胞的培养及其应用．
【答案】细胞核；十代以内的细胞能保持正常的二倍体核型；早期胚胎或原始性腺；基因表达载体；B和C；HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ；绿；抗原-抗体杂交；蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：6引用：3难度：0.7
