枯草芽孢杆菌可分泌纤维素酶。研究者筛选到一株降解纤维素能力较强的枯草芽孢杆菌菌株（B菌），从中扩增得到了一种纤维素酶（C1酶）基因。将获得的C1酶基因与高效表达载体（HT质粒）连接，再导入B菌，以期获得降解纤维素能力更强的工程菌。
（1）C1酶基因可利用PCR技术进行扩增，扩增时需要根据C1酶基因的脱氧核苷酸序列C1酶基因的脱氧核苷酸序列设计引物，引物的作用是使DNA聚合酶能够从3'端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从3'端开始连接脱氧核苷酸。
（2）对扩增到的C1酶基因测序，与数据库中的C1酶基因编码序列相比有两个碱基对不同，但两者编码出的蛋白质的氨基酸序列相同，这是因为密码子具有简并性，碱基改变后仍然能编码同一种氨基酸密码子具有简并性，碱基改变后仍然能编码同一种氨基酸。C1酶基因在DNA连接DNA连接酶的作用下可与质粒进行体外连接，C1酶基因能与质粒重组并在受体细胞中表达的遗传学基础是目的基因与质粒具有相同的组成单位和双螺旋结构，且不同生物所用的密码子相同目的基因与质粒具有相同的组成单位和双螺旋结构，且不同生物所用的密码子相同。
（3）C1酶基因以B链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为5'→3'。为了使C1酶基因按照正确的方向与已被酶切的HT质粒连接，扩增C1酶基因时在其两端添加了SmaI和BamHI的酶切位点。该基因内部没有这两种酶切位点。图1中酶切位点1和2所对应的酶分别是BamHⅠ、SmaⅠBamHⅠ、SmaⅠ。
（4）将纤维素含量为20%的培养基分为三组，一组接种工程菌，对照组1不进行处理，对照组2接种等量B菌或适量纤维素酶等量B菌或适量纤维素酶。在相同条件下培养96小时，结果如图2，说明工程菌降解纤维素的能力最强。预期该工程菌在处理废弃物及保护环境方面可能的应用降解秸秆，减少秸秆燃烧带来的空气污染降解秸秆，减少秸秆燃烧带来的空气污染。（举一例）
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】C1酶基因的脱氧核苷酸序列；使DNA聚合酶能够从3'端开始连接脱氧核苷酸；密码子具有简并性，碱基改变后仍然能编码同一种氨基酸；DNA连接；目的基因与质粒具有相同的组成单位和双螺旋结构，且不同生物所用的密码子相同；BamHⅠ、SmaⅠ；等量B菌或适量纤维素酶；降解秸秆，减少秸秆燃烧带来的空气污染
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：42引用：1难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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