回答下列（一）、（二）小题：
（一）青霉素是世界上第一个应用于临床的抗生素。早期科学家只能从青霉菌中提取少量青霉素，它的价格贵如金。随着高产菌种的选育、发酵技术的发展，青霉素步入了产业化生产的道路。
（1）高产菌种可以从自然界中籍选出来，也可以先对菌种进行

稀释

稀释

，然后在固体培养基上用划线或

涂布

涂布

的方法接种，实现对高产菌种的

分离和筛选

分离和筛选

。将高产菌株接种到发酵罐进行大型发酵，常对菌种进行扩大培养，目的是

获得细胞代谢产物（青霉素）

获得细胞代谢产物（青霉素）

。
（2）向发酵罐加入配制好的培养基后，需从发酵罐底部通入高温蒸汽对发酵罐和培养基进行

灭菌

灭菌

。
（3）发酵罐内的发酵是发酵工程的中心环节，要严格控制温度、pH和

溶解氧

溶解氧

等环境条件。青霉素可以用萃取发酵的方法进行提取，青霉菌可采用

过滤、沉淀

过滤、沉淀

（至少写出一种）等方法从培养液中分离出来。
（二）缺磷是限制苜蓿生产品质和生态、经济效益的主要因素。将多聚磷基因ppk转进紫花苜蓿，育成聚磷植物可以减少苜蓿种植区的土壤磷肥施用量，提高磷肥有效利用率。
（1）获取多聚磷基因ppk的方法有多种。可以通过构建基因文库的方法获取ppk基因，也可以通过

PCR

PCR

的方法获取大量ppk基因并采用

DNA分子杂交

DNA分子杂交

技术对产物进行分离和初步鉴定。
（2）将

损伤性刺激

损伤性刺激

处理后的紫花苜蓿的叶片与含有ppk基因的农杆菌混合培养，完成转化。用

无菌滤纸

无菌滤纸

来吸干叶片表面的菌液，并将叶片转移到含有

抗生素

抗生素

的愈伤组织诱导培养基中，除去农杆菌。
（3）在愈伤组织后续的培养过程中，需要提供适宜的培养基，并给予适宜的

光照

光照

和温度，以保证愈伤组织继续发育为完整植株。为了更加精准地鉴定所得植株中是否转入了ppk基因，可利用PCR和

抗原—抗体杂交

抗原—抗体杂交

技术进行检测。
（4）在农田和水体交界处建立聚磷苜蓿的缓冲带，可以减少水体

富营养化

富营养化

的发生。