（一）下列是高产蛋白酶的枯草芽孢杆菌的筛选过程，回答下列问题：
（1）配置脱脂牛奶固体培养基时脱脂牛奶需单独用 112℃灭菌的原因是 既能将牛奶中的杂菌杀灭又不会过多破坏牛奶中的营养成分既能将牛奶中的杂菌杀灭又不会过多破坏牛奶中的营养成分，推测还可用 过滤灭菌过滤灭菌方法达到相同的目的。配置该培养基还需调节 pH 为 中性偏碱中性偏碱。
（2）取三个不同地点的土样，用无菌水稀释。分别取 10-4、10-5、10-6 三个稀释度涂布到筛选平板中，每个稀释度做 3 个重复。
（3）将得到的平板 倒置倒置于 30℃恒温培养箱中培养 24h。观察平板上的菌落，用接种环挑取 透明圈大的/透明圈直径与菌落直径比值大透明圈大的/透明圈直径与菌落直径比值大的菌落中的菌种在脱脂牛奶平板上进行划线分离，以进一步 分离纯化分离纯化。最后将分离出的单菌落接种到 AA（ A.LB 固体斜面培养基B.LB 固体平板培养基C.马铃薯蔗糖斜面培养基D.马铃薯蔗糖平板培养基）中，于 30℃恒温培养箱中培养 24 h 后，放入 4℃冰箱中保存。
（二）番茄黄化曲叶病毒（TYLCV）是一类单链环状 DNA 病毒，能引发番茄黄化曲叶病。检测某番茄幼苗是否感染该病毒，实验人员进行以下操作：①分析 PCR 扩增结果；②从番茄幼苗组织样本中提取 DNA；③利用 PCR 扩增 DNA 片段；④采集番茄幼苗叶片组织样本。回答下列问题：
（1）若要得到正确的检测结果，正确的操作顺序应该是 ④②③①④②③①（用数字序号表示）。
（2）步骤②在番茄研磨液中加入 2mol/L 的氯化钠，作用是 溶解DNA溶解DNA；研磨液中的乙二胺四乙酸二钠（EDTA）的作用是 抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解。
（3）操作③中使用的酶是 Taq DNA聚合酶（耐高温的DNA聚合酶）Taq DNA聚合酶（耐高温的DNA聚合酶）。PCR 反应中每次循环可分为变性、退火、延伸延伸三步。
（4）PCR 扩增得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳后的结果如图：
注：M：DNA marker；1-4：空白对照、阴性对照、阳性对照、样品实验中，DNA marker 是一组 已知长度和含量的标准DNA片段已知长度和含量的标准DNA片段的混合物，起参照作用。 健康番茄幼苗的DNA健康番茄幼苗的DNA是阴性对照组，TYLCV 的 DNA 是阳性对照组。若想利用该样品植株获得无病毒的番茄幼苗，方法是 取茎尖、芽尖等幼嫩组织部位进行植物组织培养取茎尖、芽尖等幼嫩组织部位进行植物组织培养。
【答案】既能将牛奶中的杂菌杀灭又不会过多破坏牛奶中的营养成分；过滤灭菌；中性偏碱；倒置；透明圈大的/透明圈直径与菌落直径比值大；分离纯化；A；④②③①；溶解DNA；抑制DNA酶活性，防止DNA被酶解；Taq DNA聚合酶（耐高温的DNA聚合酶）；延伸；已知长度和含量的标准DNA片段；健康番茄幼苗的DNA；取茎尖、芽尖等幼嫩组织部位进行植物组织培养
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：1难度：0.6
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
2．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
