大肠菌群是指一类在35～37℃条件下培养48 h,能发酵乳糖产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌的总称，大肠杆菌属于大肠菌群的一种。我国《生活饮用水卫生标准》中关于生活饮用水的细菌标准是：一、细菌总数1 mL水中不超过100个；二、大肠杆菌数1 L水中不超过3个。国标一般采用多管发酵法检测样品中大肠菌群数，具体分为三步：

蛋白胨	10.0
牛肉膏	3.0
乳糖	5.0
氯化钠	5.0
pH	7.3±0.2
H2O	定容至1000 mL

①初发酵试验：将待测样品稀释后，选择3个稀释度，每个稀释度分别接种到5支发酵管中，37℃培养48 h,观察是否产气。
②平板分离：将产气发酵管中的菌液分别接种于伊红美蓝培养基（生长在此培养基上的大肠菌群呈深紫色，有金属光泽）上，置于37℃恒温箱内培养24h,观察菌落形态。
③复发酵试验：挑取平板上呈深紫色，有金属光泽的菌落，进行染色镜检。将镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株重复初步发酵试验。最后根据证实为大肠杆菌阳性的管数，按统计学原理即可得出大肠菌群数（每升或每100 毫升中的个数）。
（1）初发酵乳糖蛋白胨培养基配方（g/L）如表所示，按物理性质分类，乳糖蛋白胨培养基属于

液体

液体

培养基，其中的碳源有

牛肉膏、乳糖

牛肉膏、乳糖

。
（2）若检测饮用水中的大肠杆菌数，则①步骤无须稀释，原因

饮用水中大肠杆菌数非常少

饮用水中大肠杆菌数非常少

，①步 骤每个稀释度分别接种到5支发酵管中的原因是

平行重复实验，减小实验误差

平行重复实验，减小实验误差

。
（3）②步骤中不能直接用涂布器把菌液涂布在平板上进行大肠菌群计数，原因是

初发酵过程扩大了大肠菌群的数量，若使用涂布法可能由于菌液中细菌数目过多得不到单菌落

初发酵过程扩大了大肠菌群的数量，若使用涂布法可能由于菌液中细菌数目过多得不到单菌落

。
（4）伊红美蓝培养基在配制后通常用

高压蒸汽灭菌

高压蒸汽灭菌

法进行灭菌，③步骤中只能挑取符合特征的菌落其中的一小部分进行镜检，这是因为

镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株还需重复初步发酵试验，而镜检的菌株因为杂菌污染无法使用

镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌株还需重复初步发酵试验，而镜检的菌株因为杂菌污染无法使用

。