使用胰岛素能有预防肾脏移植后糖尿病的发生,但同时也会降低患者的免疫细胞对免疫抑制剂的敏感性。为验证胰岛素会降低免疫细胞对免疫抑制剂的敏感性,根据提供的实验材料,完善实验思路,预测实验结果,并进行分析与讨论。
实验材料:PBMC细胞悬液(人外周血单个核细胞,主要是淋巴细胞和单核细胞)、细胞培养液、一系列不同浓度的环孢素、胰岛素、S961、锥形瓶等。
(要求与说明:免疫抑制剂的作用程度可用半致死量IC50表示、即在规定时间内一半免疫细胞死亡时使用的免疫抑制剂浓度,环孢素是一种免疫抑制剂,S961是一种胰岛素受体拮抗剂;实验中涉及的剂量不作具体要求:实验条件适宜)
(1)完善实验思路:
①取锥形瓶若干,随即均分成4组,编号为A、B、C、D,分别加入等量适量PBMC细胞悬液和细胞培养液,用MTT法检测各组活细胞数量并记录。
A组:加入适量细胞培养液;
B组:加入等量适宜浓度的胰岛素溶液;
C组:加入 等量一系列不同浓度的环孢素等量一系列不同浓度的环孢素,作为对照;
D组:加入 等量胰岛素和一系列不同浓度的环孢素等量胰岛素和一系列不同浓度的环孢素。
②按上述分组加入相应试剂后。将培养瓶放入CO2恒温培养箱中培养96h,用MTT法检测各组活细胞数量并记录,计算C、D组的 细胞存活率细胞存活率,并得出C、D组环孢素的IC50。
(2)预测实验结果:完善坐标图。并用曲线表示C、D组的实验结果。

(3)①患者肾脏移植后,须使用免疫抑制剂的原因是 免疫抑制剂能降低免疫系统对移植器官的排斥,提高移植器官的存活率免疫抑制剂能降低免疫系统对移植器官的排斥,提高移植器官的存活率。
②若实验中A、B组的细胞存活情况相同,说明 外源胰岛素对PBMC细胞无毒性外源胰岛素对PBMC细胞无毒性。
③进一步研究发现PBMC细胞中 胰岛素受体胰岛素受体的表达量增加,说明胰岛素可能是直接作用于免疫细胞,提高了其活性。为了证明此作用,可增加一组实验组,该组的处理是 胰岛素+环孢素D组IC50+S961胰岛素+环孢素D组IC50+S961。
【考点】免疫学的应用.
【答案】等量一系列不同浓度的环孢素;等量胰岛素和一系列不同浓度的环孢素;细胞存活率;免疫抑制剂能降低免疫系统对移植器官的排斥,提高移植器官的存活率;外源胰岛素对PBMC细胞无毒性;胰岛素受体;胰岛素+环孢素D组IC50+S961
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:9引用:1难度:0.5
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