二十碳五烯酸（EPA）能促进体内饱和脂肪酸代谢，是人体自身不能直接从头合成但又不可缺少的营作物质。获取EPA产品的主要途径是从鱼油等海洋渔业资源中提取。研究人员利用转基因技术从海洋细菌中提取了EPA合成途径的关键基因pfaB，并将其导入酵母菌内，通过酵母菌发酵生产EPA，相关过程如图所示，请回答下列问题：
（1）利用PCR扩增pfaB基因前，需设计引物 ①④①④（填序号），在第 三三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段（pfaB基因）。
（2）利用PCR扩增pfaB基因时，需将温度上升到90℃后再降温至50℃，其目的是 使pfaB基因双链解旋为单链后，便于引物与模板链通过碱基互补配对原则结合使pfaB基因双链解旋为单链后，便于引物与模板链通过碱基互补配对原则结合。将pfaB基因连接在pPIC9质粒上时所用的酶是 DNA连接酶（和限制酶）DNA连接酶（和限制酶）。
（3）将pfaB-pPIC9表达载体导入酵母菌前，需先将表达载体导入大肠杆菌并进行筛选，筛选时培养基中应加入 氨苄青霉素氨苄青霉素，再将含有表达载体的大肠杆菌与酵母菌置于电转杯中，通过电激将大肠杆菌导入酵母菌，该表达载体在酵母菌中不会随着酵母菌繁殖而丢失的原因是 表达载体上含有真核生物复制原点，能在酵母菌中复制表达载体上含有真核生物复制原点，能在酵母菌中复制。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】①④；三；使pfaB基因双链解旋为单链后，便于引物与模板链通过碱基互补配对原则结合；DNA连接酶（和限制酶）；氨苄青霉素；表达载体上含有真核生物复制原点，能在酵母菌中复制
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/4/20 14:35:0组卷：23引用：2难度：0.6
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
相关试卷
