四尾栅藻具有环境适应能力强和生长速度快等优点，如果能将其进行品种改良，提高含油量，有望解决微藻生物柴油产业化进程的瓶颈。研究人员利用基因工程技术将油料作物紫苏DGAT1基因导入四尾栅藻，获得转基因的产油微藻，利用地热废水培养，不仅能生产生物柴油，还能治理地热废水。操作过程如下图，请回答下列问题：
注：LacZ基因编码产生的酶可以分解物质X-gal,从而使菌落显现出蓝色。若无该基因或该基因被破坏，则菌落呈白色。
（1）将质粒pMD19-DGAT1导入大肠杆菌前，通常先用Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于一种 能吸收周围环境中DNA分子能吸收周围环境中DNA分子的生理状态。
（2）图中接种大肠杆菌的培养基pH一般为 中性或弱碱性中性或弱碱性。为了便于重组质粒的筛选，该选择培养基中应添加 氨苄青霉素和X-gal氨苄青霉素和X-gal。导入 没有连接目的基因的质粒（或空质粒；或pMD19质粒）没有连接目的基因的质粒（或空质粒；或pMD19质粒）的大肠杆菌菌落成蓝色，导入 重组质粒（或pMD19-DGAT1质粒）重组质粒（或pMD19-DGAT1质粒）的大肠杆菌菌落成白色。
（3）由上图推测，用 BamHⅠBamHⅠ和 XbaⅠXbaⅠ酶切割pMD19-DGAT1获得 DGAT1基因，并与酶切后的载体pBI121连接再次构建基因表达载体，用这两种酶切割的目的是 保证其准确插入质粒并防止其出现自身环化等问题（或防止反向连接和自身环化）保证其准确插入质粒并防止其出现自身环化等问题（或防止反向连接和自身环化）。
（4）为检测转基因四尾栅藻对地热废水的去污能力，研究人员设计实验并得到相应实验结果如表。
| 指标 | 总氮（mg/L） | 总磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 废水培养基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培养转基因四尾栅藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
应添加对照组：废水培养非转基因四尾栅藻11天后，检测总氮、总磷和氟化物的含量
应添加对照组：废水培养非转基因四尾栅藻11天后，检测总氮、总磷和氟化物的含量
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】能吸收周围环境中DNA分子；中性或弱碱性；氨苄青霉素和X-gal；没有连接目的基因的质粒（或空质粒；或pMD19质粒）；重组质粒（或pMD19-DGAT1质粒）；BamHⅠ；XbaⅠ；保证其准确插入质粒并防止其出现自身环化等问题（或防止反向连接和自身环化）；应添加对照组：废水培养非转基因四尾栅藻11天后，检测总氮、总磷和氟化物的含量
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：34引用：2难度：0.6
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