单克隆抗体技术在生物工程中有着广泛的应用，图1是单克隆抗体制备流程图，图2是我国科研人员为了准确筛选没有明显表型特征的某种微生物所采用的流程图，图4是某双特异性抗体作用示意图，双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。
（1）据图2分析，科研人员利用目标微生物编码膜蛋白的基因序列，构建 基因的表达载体基因的表达载体，并导入用 Ca2+或CaCl2Ca2+或CaCl2处理的大肠杆菌细胞中，获取大量膜蛋白。
（2）已知细胞合成DNA有“D途径”和“S途径”两条途径，其中“D途径”能被氨基蝶呤阻断。兔子的已免疫的淋巴细胞有上述两种途径，但一般不分裂增殖；兔子的骨髓瘤细胞中只有“D途径”，但能不断分裂增殖。据此，图1所示的 HAT培养基HAT培养基（填“HAT培养基”/“多孔板”）中添加氨基蝶呤可以达到筛选目的，其原理是 淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，故不能在HAT培养液中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养液中因DNA合成途径被氨基蝶呤阻断而不能进行DNA复制，而不生长淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，故不能在HAT培养液中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养液中因DNA合成途径被氨基蝶呤阻断而不能进行DNA复制，而不生长。
（3）将上述带有荧光的单克隆抗体与待分离微生物群体混合，目的是 标记标记目标微生物。用流式细胞仪分离不同荧光强度的细胞，结果如图3所示。对结果进行比较，应从区域 ②②（选填图中数字）的细胞中筛选目标微生物。
（4）与直接使用抗肿瘤药物相比，将抗肿瘤药物与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是 双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，体现的是双特异性单克隆抗体在 治疗疾病（运载药物）治疗疾病（运载药物）方面的用途。
【考点】单克隆抗体及其应用．
【答案】基因的表达载体；Ca2+或CaCl2；HAT培养基；淋巴细胞和淋巴细胞自身融合细胞因缺乏在体外培养液中增殖的能力，故不能在HAT培养液中生长；骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合细胞在HAT培养液中因DNA合成途径被氨基蝶呤阻断而不能进行DNA复制，而不生长；标记；②；双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；治疗疾病（运载药物）
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：20引用：2难度：0.6
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1．CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如图流程进行了实验。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：7引用：3难度：0.6 -
2．使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是（ ）
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3．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是，过程②选用的骨髓瘤细胞（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行和，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是（答出一点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是。图2方框内需要经过次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。发布：2024/12/31 1:30:1组卷：21引用：4难度：0.5
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