为获得具有抗玉米螟、抗除草剂草甘膦和抗旱性状的优良转基因玉米，科研人员把重组到同一植物表达载体的cry1ACM、epsps、GTA和ZmPIS转入植株，获得转基因植株。其中cry1AcM是抗玉米螟基因，epsps和GAT两个基因同时发挥作用时，能有效提高玉米植株抗御草甘膦的能力，ZmPIS是抗旱基因。通过逐代除草剂筛选、分子检测和抗虫性鉴定，从大量转基因株系中优选出优良玉米株系。构建的基因表达载体部分示意图如图，请回答下列问题：
（1）构建基因表达载体时，需要的工具酶有限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶。根据基因表达载体的结构组成分析，pUbi和P35S是启动子启动子，其功能是RNA聚合酶识别并结合的位点，驱动转录的进行RNA聚合酶识别并结合的位点，驱动转录的进行。
（2）将基因表达载体导入玉米受体细胞中最常用的方法是农杆菌转化法农杆菌转化法，玉米细胞经植物组培获得植株，待植株长出新叶后喷洒含除草剂草甘膦除草剂草甘膦的水溶液，选取存活植株移栽到温室，以获得具有除草剂抗性的植株。
（3）为检测抗旱基因是否导入玉米细胞，可采用DNA分子杂交DNA分子杂交技术进行检测。除此之外也可采用PCR技术进行检测，在PCR反应体系中，应加入待测玉米细胞的基因组DNA基因组DNA，抗旱基因的22种引物、dNTP等物质，若扩增后进行电泳时出现阳性反应，则导入成功。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制酶和DNA连接酶；启动子；RNA聚合酶识别并结合的位点，驱动转录的进行；农杆菌转化法；除草剂草甘膦；DNA分子杂交；基因组DNA；2
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/9 8:0:8组卷：18引用：3难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
