干燥综合征（SS）是临床常见的一种自身免疫病，患者血清中存在多种抗体，其中以SSB抗体特异性最强。如图表示科研人员利用基因工程技术获得SSB蛋白及利用SSB蛋白对小鼠进行免疫的过程。回答下列问题：
（1）利用RNA通过①过程获得cDNA需要 逆转录逆转录酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保护尾部不被降解。为了针对性获得cDNA，应如何设计逆转录第一步时的DNA引物 用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物，设计引物的目的是 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。
（2）为确保与pET41a质粒定向连接，对逆转录得到的cDNA扩增时，应在相应引物的 5’5’（填“5'”或“3'”）端加上 BamHⅠ和XhoⅠBamHⅠ和XhoⅠ酶切位点。
（3）③过程用重组质粒转染大肠杆菌时，需要用Ca2+处理大肠杆菌，目的是 使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态，然后将处理后的大肠杆菌先接种在添加 卡那霉素卡那霉素的培养基（A）上培养，待长出菌落后再利用无菌膜同位置转移到添加 氯霉素氯霉素的培养基（B）上培养，收集 能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长的能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长的菌落进一步纯化后将菌体破碎处理，筛选得到SSB蛋白。
（4）将改造后的大肠杆菌生产的SSB蛋白注入到小鼠体内是为了检测该蛋白是否具有抗原性，则后续实验内容应为抽取小鼠血液 提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体。
【答案】逆转录；用多聚胸腺嘧啶脱氧核苷酸序列为引物；使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；5’；BamHⅠ和XhoⅠ；使大肠杆菌成为易于吸收外源DNA的状态；卡那霉素；氯霉素；能在含卡那霉素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长的；提取其中的抗体，利用抗原—抗体杂交的方法检测其是否含有抗SSB的抗体
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/4 8:0:8组卷：79引用：3难度：0.4
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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