将微生物接种在只缺少某种营养物质的基础培养基中，再将所缺的营养物质点植于平板上，该营养物质便逐渐扩散于植点周围。该微生物若需要此种营养物质，便在这种营养物质扩散处生长繁殖，形成肉眼可见的菌落圈，这种测定微生物营养需求的方法称为生长谱法。某兴趣小组尝试用生长谱法测定某种大肠杆菌对糖类（碳源）的需求情况，操作流程如下：
Ⅰ.培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如表（加水定容至1L）：
| 成分 | NaCl | KH2PO4 | K2HPO4 | （HN4）2SO4 | MgSO4•7H2O | 琼脂 |
| 质量/g | 1 | 0.5 | 0.5 | 2 | 0.2 | 20 |
Ⅱ.将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至50℃的固体培养基混匀，倒平板。
Ⅲ.将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区，并注明要点植的糖类名称。
Ⅳ.通过无菌操作分别加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片，待平板吸收干燥后倒置培养24小时。
结合所学知识，回答下列问题：
（1）无碳培养基配方中加入（NH4）2SO4的目的是
提供氮源（供微生物合成含氮有机物）
提供氮源（供微生物合成含氮有机物）
。对培养基及糖溶液通常采用的灭菌方法是 高压蒸汽灭菌
高压蒸汽灭菌
。倒平板后用 稀释涂布平板
稀释涂布平板
法进行接种。（2）该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生，但大小不同，据此得到的初步结论是
大肠杆菌可以利用四种糖类（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖）作为碳源，但利用的程度不同
大肠杆菌可以利用四种糖类（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖）作为碳源，但利用的程度不同
。（3）生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株（失去合成某种生长因子能力的菌株）的筛选和鉴定，例如大肠杆菌经紫外线诱变处理后会产生一些营养缺陷型突变个体，现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液，但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸-维生素缺陷型，某生物兴趣小组用生长谱法设计实验进行鉴定，请将他们的实验设计补充完整。
实验思路：将菌悬液与溶化并冷却至50℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀，倒平板；将培养基划分成两个相等的区域A、B；A区
点植氨基酸
点植氨基酸
、B区 点植维生素
点植维生素
；在适宜温度下培养，观察菌落产生的区域。实验结果及结论：
若菌落只在A区产生，则为氨基酸缺陷型 若菌落只在B区产生，则为维生素缺陷型；若菌落产生在AB交界处，则为氨基酸-维生素缺陷型
若菌落只在A区产生，则为氨基酸缺陷型 若菌落只在B区产生，则为维生素缺陷型；若菌落产生在AB交界处，则为氨基酸-维生素缺陷型
。【答案】提供氮源（供微生物合成含氮有机物）；高压蒸汽灭菌；稀释涂布平板；大肠杆菌可以利用四种糖类（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖）作为碳源，但利用的程度不同；点植氨基酸；点植维生素；若菌落只在A区产生，则为氨基酸缺陷型 若菌落只在B区产生，则为维生素缺陷型；若菌落产生在AB交界处，则为氨基酸-维生素缺陷型
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：14引用：3难度：0.7
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1．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
