赖氨酸是人体细胞不能合成的必需氨基酸。科学家把某种必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因（R）导入玉米中，使玉米中赖氨酸的含量提高30%。回答下列问题。
（1）利用PCR技术扩增R基因时，需要在一定的缓冲液中才能进行，其中需要加入酶和激活该酶所需的 耐高温的DNA聚合酶、Mg2+耐高温的DNA聚合酶、Mg2+。为了特异性扩增R基因序列，需根据 R基因两端的碱基（核苷酸）序列R基因两端的碱基（核苷酸）序列设计特异性引物。
（2）在构建基因表达载体时，若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，提高重组效率，应该选择的限制酶是 PstI、EcoRIPstI、EcoRI。
（3）随着转化方法的突破，农杆菌侵染玉米这种单子叶植物也取得了成功。科研人员从新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，当农杆菌侵染玉米细胞后，能将 Ti质粒Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到 该细胞的染色体DNA上该细胞的染色体DNA上。
（4）检测R基因是否表达的方法是 分子杂交技术分子杂交技术。
（5）在基因工程中若要培养转基因小鼠，将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是 显微注射法显微注射法，常用的受体细胞是 受精卵受精卵。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】耐高温的DNA聚合酶、Mg2+；R基因两端的碱基（核苷酸）序列；PstI、EcoRI；Ti质粒；该细胞的染色体DNA上；分子杂交技术；显微注射法；受精卵
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：14引用：1难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7 -
3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
