医学研究发现，人体肝细胞中产生的抗凝血酶Ⅲ在抗凝血、防血栓方面具有重要作用。研究人员通过培育山羊乳腺生物反应器大量生产抗凝血酶Ⅲ．请回答下列问题：
（1）应从人的肝细胞中提取并分离mRNA，逆转录成单链DNA．根据已知的抗凝血酶Ⅲ基因的碱基序列设计特异性

引物

引物

，经PCR和电泳，可得到大量抗凝血酶Ⅲ基因，此过程所用原料为

4种脱氧核苷酸

4种脱氧核苷酸

。
（2）重组后的人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体由山羊β-酪蛋白基因启动子、抗凝血酶Ⅲ基因、标记基因和终止子组成。其中

山羊β-酪蛋白基因启动子

山羊β-酪蛋白基因启动子

决定了抗凝血酶Ⅲ基因只能在山羊乳腺细胞中特异性表达。
（3）山羊的ES细胞来自早期胚胎干细胞。在饲养层细胞上培养时，ES细胞具有

只分裂不分化

只分裂不分化

的特性。将重组人抗凝血酶Ⅲ基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞时，目的基因表达载体进入ES细胞的方式为

胞吞

胞吞

。
（4）对山羊进行同期发情和超数排卵处理，得到代孕母羊和多个卵母细胞，当卵母细胞培养至

MⅡ中期

MⅡ中期

时，可去核并移入上述ES细胞的细胞核，完成核移植。为选择雌性胚胎，可在囊胚

滋养层

滋养层

时取细胞做DNA分析用以鉴定性别。检测羊奶中是否含有抗凝血酶Ⅲ的方法是

抗原一抗体杂交

抗原一抗体杂交

。