科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图1:

(1)步骤①的技术名称是动物体细胞核移植技术动物体细胞核移植技术。
(2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有发育的全能性发育的全能性。
(3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的基因表达载体基因表达载体,对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用的限制酶组合为HindⅢ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠEcoRⅠ和PstⅠ。
(4)为了得到实验所需的大量干扰素基因,研究人员利用PCR 技术进行扩增。由于DNA复制时,子链只能由5′向3′方向延伸,因此可以从图2A、B、C、D四种单链DNA片段中选取B和CB和C作为引物。若要将1个干扰素基因复制10 次,则需要在缓冲液中至少加入211-2211-2个引物。

(5)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发绿绿色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达,可以采用抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交的方法。
【考点】体外受精和胚胎移植.
【答案】动物体细胞核移植技术;发育的全能性;基因表达载体;HindⅢ和PstⅠ;EcoRⅠ和PstⅠ;B和C;211-2;绿;抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:22引用:2难度:0.5