拟南芥的耐寒性与AtCOR15a基因受低温诱导后表达的AtCOR15a蛋白相关。研究人员将该基因作为目的基因培育抗冻的番茄新品种。图1、图2分别为构建的能够表达AtCOR15a的表达载体及培育流程示意图，请回答下列问题：
（1）要想短时间内获得大量的AtCOR15a基因所采用的技术为 PCRPCR，该技术构建的反应体系中应加入 AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、缓冲液AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、缓冲液。可通过PCR技术在所有DNA分子中专一性扩增出AtCOR15a基因，其原因是 引物是根据目的基因的一段已知序列设计合成的引物是根据目的基因的一段已知序列设计合成的。
（2）位于AtCOR15a基因上游的RD29A是诱导型启动子，根据题干信息推测其在转基因植物中的作用是 使目的基因在低温条件的诱导下开始转录使目的基因在低温条件的诱导下开始转录，表达载体中nptⅡ基因赋予受体细胞抗卡那霉素的能力，其作用是 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来。
（3）表达载体构建时，AtCOR15a基因和nptⅡ基因应整合在Ti质粒的T-DNA内部，是因为 Ti质粒仅使T-DNA片段可以进入番茄细胞并整合到植物细胞染色体的DNA中Ti质粒仅使T-DNA片段可以进入番茄细胞并整合到植物细胞染色体的DNA中。
（4）图2中扩大培养的培养基类型为 液体液体（填“固体”或“液体”）培养基，③④过程的培养条件是不同的，请列举两点 两培养基的植物激素比例不同、对光照的需求条件也不同两培养基的植物激素比例不同、对光照的需求条件也不同。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】PCR；AtCOR15a基因（模板DNA）、dNTP、引物、Taq酶、缓冲液；引物是根据目的基因的一段已知序列设计合成的；使目的基因在低温条件的诱导下开始转录；鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来；Ti质粒仅使T-DNA片段可以进入番茄细胞并整合到植物细胞染色体的DNA中；液体；两培养基的植物激素比例不同、对光照的需求条件也不同
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：20引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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