禽呼肠孤病毒(ARV)对养禽业的发展造成了巨大的威胁,研制疫苗防控禽呼肠孤病毒感染是既经济又有效的手段。近年来,我国的ARV基因工程疫苗的研制取得了较大进步,在该疫苗的研制过程中,σC蛋白基因成为候选基因。请回答下列问题:
(1)ARV是RNA病毒,为获得控制σC蛋白合成的DNA片段,可以利用病毒RNA为模板合成cDNA,这一过程需要的酶是 逆转录酶逆转录酶,再通过 PCRPCR技术扩增相应的DNA片段。
(2)为了确保能准确得到σC蛋白基因,在设计PCR引物时必须根据σC蛋白基因两端的 (特异性)核苷酸序列(特异性)核苷酸序列来进行。PCR过程每次循环分为3步,依次是 变性、复性、延伸变性、复性、延伸。
(3)活载体疫苗是最具发展空间的疫苗之一。科研人员通过基因工程构建了能表达σC蛋白基因的重组减毒沙门菌,构建的基本流程包括四个环节:获取σC蛋白基因; 基因表达载体的构建基因表达载体的构建;将σC蛋白基因导入减毒沙门菌; σC蛋白基因的检测与鉴定σC蛋白基因的检测与鉴定。
(4)将重组减毒沙门菌注射到雏鸡体内,重组减毒沙门菌表达的σC蛋白作为 抗原抗原引起机体产生特异性免疫。为保证疫苗接种安全和效果稳定,在应用时需考虑疫苗接种的 剂量和接种次数剂量和接种次数。
【答案】逆转录酶;PCR;(特异性)核苷酸序列;变性、复性、延伸;基因表达载体的构建;σC蛋白基因的检测与鉴定;抗原;剂量和接种次数
【解答】
【点评】
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