苏云金芽孢杆菌中含有一种抗虫基因（Bt基因），通过产生苏云金芽孢杆菌伴孢晶体蛋白（Bt抗虫蛋白），破坏鳞翅目昆虫的消化系统来杀死棉铃虫。科学家将该细菌的“杀虫基因”转移到棉花里，培育出了抗虫棉，让棉花也能产生Bt抗虫蛋白抵抗虫害。如图中箭头处为EcoRⅠ或BamHⅠ限制酶的酶切位点，回答下列问题：
（1）基因工程中把Bt基因称为 目的基因目的基因，可利用PCR技术获取并扩增B基因，前提是要有一段已知的Bt基因的核苷酸序列，这是因为 利用PCR技术扩增目的基因需要两种引物，合成引物的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列利用PCR技术扩增目的基因需要两种引物，合成引物的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列。
（2）构建重组质粒时，可将Bt基因连接到质粒的T-DNA序列中，这样做的意义是 T-DNA序列可将目的基因整合到宿主细胞的染色体DNA上T-DNA序列可将目的基因整合到宿主细胞的染色体DNA上。
（3）实际操作中，一般采用EcoRⅠ和BamHⅠ两种酶进行切割。与只采用EcoRⅠ酶切割相比，用两种酶切割的优势：一是避免 目的基因和质粒自身环化目的基因和质粒自身环化，二是避免 造成反向连接造成反向连接。
（4）检测到Bt基因导入宿主细胞后还要检测目的基因是否表达Bt毒蛋白，常用的方法是 抗原─抗体杂交抗原─抗体杂交，转基因棉花是否培育成功还要对棉花进行 抗虫接种抗虫接种检验。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】目的基因；利用PCR技术扩增目的基因需要两种引物，合成引物的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；T-DNA序列可将目的基因整合到宿主细胞的染色体DNA上；目的基因和质粒自身环化；造成反向连接；抗原─抗体杂交；抗虫接种
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：5引用：2难度：0.5
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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