酵母菌是我们在生活中发面、酿酒时常用的微生物，也可利用基因工程技术改造酵母菌而生产大量的人胰岛素，减轻糖尿病患者经济负担。回答下列问题：
（1）为了培养酵母菌，培养基的配方是：选择去皮马铃薯丝20g,

蔗糖

蔗糖

2g,琼脂2g,水100mL；经加热溶化后，分装，放入高压蒸汽锅灭菌后，制成固体和

斜面

斜面

培养基。
（2）用稀释涂布平板法接种时，先用

无菌水

无菌水

对酵母菌液进行一定浓度的稀释，涂布前，手持涂布器的部位要高于火焰，以免

酒精

酒精

沿器具流下，烧伤手指；能够分离出纯种单菌落的依据是

培养基表面表现出的最小菌落、且各特征相同

培养基表面表现出的最小菌落、且各特征相同

。
（3）要了解酵母菌的繁殖速度，可用显微镜计数法测定：滴加酵母菌悬液时，一方面要避免菌液滴到盖玻片上，另一方面要注意

防止产生气泡

防止产生气泡

，以免影响计数器结果；16个中方格的血细胞计数板在显微镜下可采用

四

四

点取样进行计数。发酵食品的不同风味是由多种因素造成的，传统酿造不仅仅需要酵母菌，还要有其他菌种，原因是在发酵过程中

分泌酶

分泌酶

不同，它们所发挥的作用就不同。
（4）与大肠杆菌比较，用酵母菌作为生产的人胰岛素受体的优点

表达的产物更接近人的胰岛素，后期加工更少而简单

表达的产物更接近人的胰岛素，后期加工更少而简单

；对含有人胰岛素目的基因的酵母菌PCR扩增时要加入2U/μLTaqDNA聚合酶，其中“U”是

酶活力

酶活力

单位；缓冲液中加入含有少许

溴酚蓝

溴酚蓝

作为电泳指示剂；检测人胰岛素基因及其表达产物功效可从DNA、RNA、胰岛素和

注射到人体内具有降血糖作用，并且没有副作用

注射到人体内具有降血糖作用，并且没有副作用

四个方面来进行。