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如图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料．图中质粒表示基因工程中经常选用的载体--pBR322质粒，Amp表示青霉素抗性基因，Tet表示四环素抗性基因．根据如图回答下列问题（限制酶Pst,1、EcoR1和HindⅢ切割形成的末端均不相同）；
（1）过程②需要（逆）反转录（逆）反转录酶，得到的cDNA一般比从基因组文库中获得的目的基因要小的多，原因是不含内含子不含内含子．过程④需要DNA连接DNA连接酶，过程⑤中要提高成功率，常用Ca2+（或CaCl2溶液）Ca2+（或CaCl2溶液）处理大肠杆菌．
（2）如果用限制酶Pst、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒-pBR322进行切割，用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时，则形成的DNA片段共99种．
（3）基因表达载体除了目的基因和抗性基因外，至少还有启动子、复制原点、终止子启动子、复制原点、终止子等（至少答两个）．
（4）如果只用限制酶PstI切割目的基因和质粒pBR322，完成过程④⑤后，将三角瓶内的大肠杆菌（不含Amp′、Tet′抗性质粒）先接种到甲培养基上，形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落，分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示．接种到甲培养基上的目的是筛选含四环素抗性基因含四环素抗性基因的大肠杆菌，含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态是在乙中不能存活在乙中不能存活、在丙中存活在丙中存活，也可以用DNA分子杂交DNA分子杂交方法进行检测．
（5）酵母菌细胞也常常作为基因工程的受体细胞，与大肠杆菌等细胞相比，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行加工（或修饰 ）加工（或修饰 ）并分泌到细胞外，便于提取．
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】（逆）反转录；不含内含子；DNA连接；Ca2+（或CaCl2溶液）；9；启动子、复制原点、终止子；含四环素抗性基因；在乙中不能存活；在丙中存活；DNA分子杂交；加工（或修饰 ）
【解答】
【点评】
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发布：2024/12/12 8:0:1组卷：6引用：2难度：0.5
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
