稻瘟病是水稻最重要的病害之一,为达到防治目的,科研人员通过转基因技术培育出了抗稻瘟病水稻品种。回答下列问题:
(1)通过RT-PCR技术以抗稻瘟病基因的RNA为模板扩增出cDNA.在PCR过程中,两个引物是热稳定DNA聚合酶热稳定DNA聚合酶酶的结合位点;用cDNA单链与该抗性水稻植株的单链DNA进行分子杂交,可能出现游离的单链区,其原因是DNA分子含有内含子、非编码区等序列,mRNA分子中没有相应互补的碱基序列DNA分子含有内含子、非编码区等序列,mRNA分子中没有相应互补的碱基序列。
(2)利用RT-PCR技术扩增基因时,设计两种引物的碱基序列的主要依据是X基因两端的部分脱氧核苷酸序列X基因两端的部分脱氧核苷酸序列,为了便于扩增后的X基因与质粒连接,常在两条引物上设计加入不同的限制酶酶切位点,主要目的是使X基因能定向插入表达载体,减少自连使X基因能定向插入表达载体,减少自连。
(3)基因工程中,将重组质粒导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法农杆菌转化法,导入动物受精卵采用的方法是显微注射法显微注射法。
(4)若要检测抗稻瘟病基因是否翻译出相应蛋白质,可采用的分子水平的检测方法是抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定.
【答案】热稳定DNA聚合酶;DNA分子含有内含子、非编码区等序列,mRNA分子中没有相应互补的碱基序列;X基因两端的部分脱氧核苷酸序列;使X基因能定向插入表达载体,减少自连;农杆菌转化法;显微注射法;抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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