采矿污染和不当使用化肥导致重金属镉（Cd）在土壤中过量积累。利用植物修复技术将土壤中的Cd富集到植物体内，进行后续处理（例如，收集植物组织器官异地妥善储存），可降低土壤中Cd的含量。为提高植物对Cd污染土壤的修复能力，研究者将酵母液泡Cd转运蛋白（YCF1）基因导入受试植物，并检测了相关指标。回答下列问题：
（1）为获取YCF1基因，将酵母细胞的全部DNA提取、切割后与载体连接，该过程所需要的两种酶是

限制酶和DNA连接酶

限制酶和DNA连接酶

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（2）将DNA序列插入Ti质粒构建重组基因表达载体时，重组基因表达载体中含有启动子、标记基因等，启动子的作用是

RNA聚合酶识别和结合部位，驱动目的基因转录出mRNA

RNA聚合酶识别和结合部位，驱动目的基因转录出mRNA

，标记基因的作用是

供重组DNA分子的筛选与鉴定

供重组DNA分子的筛选与鉴定

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（3）进行前期研究时，将含有YCF1基因的重组基因表达载体导入受试双子叶植物印度芥菜，采用最多的方法是

农杆菌转化法

农杆菌转化法

。研究者进一步获得了转YCF1基因的不育杨树株系，采用不育株系作为实验材料的目的是

防止目的基因经花粉在自然界中的扩散污染

防止目的基因经花粉在自然界中的扩散污染

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（4）将长势-致的野生型和转基因杨树苗移栽到Cd污染的土壤中，半年后测定植株干重（图1）及不同器官中Cd含量（图2）。据图1可知，与野生型比，转基因植株对Cd具有更强的

耐性

耐性

（填“耐性”或“富集能力”）；据图2可知，对转基因植株的

茎和叶

茎和叶

进行后续处理对于缓解土壤Cd污染最为方便有效。

（5）已知YCF1特异定位于转基因植物细胞的液泡膜上。据此分析，转基因杨树比野生型能更好地适应高Cd环境的原因是

YCF1可通过主动运输将Cd离子运到液泡中，提高了细胞液的浓度，有利于植株吸水

YCF1可通过主动运输将Cd离子运到液泡中，提高了细胞液的浓度，有利于植株吸水

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