如表列出了4种限制酶的识别序列及切割位点，其中↓表示切割位点；图1表示含目的基因的DNA结构与限制酶酶切图谱，其中β链为转录模板链；图2表示某质粒的结构与限制酶酶切图谱。现利用表中所列限制酶、图示目的基因和质粒构建基因表达载体，进而培育转基因植物。回答下列问题：
| 限制酶 | BamHⅠ | Sau3AⅠ | BclⅠ | EcoRⅠ |
| 识别序列 | -G↓GATCC- | -↓GATC- | -T↓GATCA- | -G↓AATTC- |
（1）运用PCR技术扩增图1所示目的基因时，需要选用的引物是引物B和
引物C
引物C
。（2）为利于目的基因的定向插入和减少随意连接，处理含目的基因的DNA片段时应选用
BamHⅠ和EcoRⅠ
BamHⅠ和EcoRⅠ
两种限制酶，图2中卡那霉素抗性基因的作用是 筛选出含有目的基因的细胞
筛选出含有目的基因的细胞
。（3）Ti质粒上的T-DNA具有可转移并整合到受体细胞
染色体DNA
染色体DNA
上的特性。培育转基因植物时，受体细胞可以是受精卵或分化的体细胞，而培育转基因动物只能将基因表达载体导入受精卵，原因是 高度分化的植物细胞仍保持着全能性，但动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制
高度分化的植物细胞仍保持着全能性，但动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制
。（4）转基因植物细胞经过
脱分化、再分化
脱分化、再分化
过程可培育成试管苗，运用的是 植物组织培养
植物组织培养
技术。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】引物C；BamHⅠ和EcoRⅠ；筛选出含有目的基因的细胞；染色体DNA；高度分化的植物细胞仍保持着全能性，但动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受到限制；脱分化、再分化；植物组织培养
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：16引用：4难度：0.5
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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