番茄红素具有一定的抗癌效果，但在番茄红素环化酶的催化作用下，易转化为胡萝卜素，科学家利用基因工程设计了重组DNA（质粒三），并导入番茄细胞，从而阻止番茄红素的转化，提高番茄红素的产量，下图为利用质粒一和目的基因构建重组质粒三的过程示意图，请回答下列问题
（1）该过程中用到的工具有限制酶、DNA连接酶、运载体（质粒）限制酶、DNA连接酶、运载体（质粒），图中“目的基因”是番茄红素环化酶番茄红素环化酶基因。
（2）先构建“质粒二”的原因主要是利用质粒二中含有BamHⅠ和Ecl酶的识别序列（和切割位点）BamHⅠ和Ecl酶的识别序列（和切割位点），利用限制酶BamH I开环后去磷酸化的目的是防止自身环化防止自身环化，再利用BamH I及Ecl酶切的目的是确保目的基因反向连接确保目的基因反向连接。
（3）质粒三导入受体细胞并表达后，行成双链RNA（发卡）的原因是转录后的RNA分子中存在互补配对的碱基序列转录后的RNA分子中存在互补配对的碱基序列。“发卡”在受体细胞内可以阻止翻译翻译过程，从而使基因“沉默”。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制酶、DNA连接酶、运载体（质粒）；番茄红素环化酶；BamHⅠ和Ecl酶的识别序列（和切割位点）；防止自身环化；确保目的基因反向连接；转录后的RNA分子中存在互补配对的碱基序列；翻译
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：208引用：2难度：0.6
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
