人乳铁蛋白是一种重要的药用保健蛋白。如图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的部分过程。图中Tet表示四环素抗性基因，Amp表示氨苄青霉素抗性基因，四种限制酶的识别序列及切割位点如表所示。回答下列问题：
| 限制酶 | BamHⅠ | HaeⅢ | BclⅠ | NotⅠ |
| 识别序列 及切割位点 |
G↓GATCC CCTAG↑G |
GG↓CC CC↑GG |
T↓GATCA ACTAG↑T |
GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG |
人体发育某个时期的mRNA经反转录产生DNA片段，与载体连接后导入受体菌群体储存
人体发育某个时期的mRNA经反转录产生DNA片段，与载体连接后导入受体菌群体储存
。（2）为构建重组载体，应选择
BamHⅠ和BclⅠ
BamHⅠ和BclⅠ
酶对目的基因和质粒进行切割。将上述酶切后得到DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为 
（3）以大肠杆菌为受体细胞，将酶切后的连接产物导入受体细胞。为筛选出导入目的基因的受体菌，首先需要将得到的上述大肠杆菌接种到含
氨苄青霉素
氨苄青霉素
培养基（A）上，一段时间后，将A上生长的菌落拓印到含四环素
四环素
培养基（B）上，在B上能生长的 不是
不是
（填“是”或“不是”）成功导入重组质的受体菌。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因不能表达，其最可能的原因是 用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因与质粒反向连接
用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因与质粒反向连接
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】人体发育某个时期的mRNA经反转录产生DNA片段，与载体连接后导入受体菌群体储存；BamHⅠ和BclⅠ；；氨苄青霉素；四环素；不是；用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因与质粒反向连接
；氨苄青霉素；四环素；不是；用BamHⅠ酶和BclⅠ酶切形成的黏性末端相同，部分目的基因与质粒反向连接【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：3引用：2难度：0.6
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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