针对病毒的疫苗有重组蛋白疫苗、核酸疫苗(包括DNA疫苗和RNA疫苗)等。如图为其中某病毒一种疫苗的研发思路,图中①~⑦表示过程,B图中箭头指示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位点(四种酶的识别序列详见表),标记基因SUC2控制合成蔗糖酶,使P型酵母菌能利用培养基中的蔗糖生存。
限制酶 | NeoⅠ | SphⅠ | NheⅠ | BamHⅠ |
识别序列和切割位点 | C↓CATGGG | CATG↓C | G↓GATCC | G↓CTAGC |

(1)图中①过程需要先通过
逆转录
逆转录
过程得到cDNA,再利用PCR扩增S基因,若扩增5个循环,则需要引物 62
62
个。(2)为使③过程顺利进行,需先使用限制药
NcoⅠ
NcoⅠ
和 NheⅠ
NheⅠ
切割质粒B。(3)为达到利用标记基因筛选的目的,非转基因的普通P型酵母菌应该满足的条件是
自身不能合成蔗糖酶
自身不能合成蔗糖酶
。(4)重组疫苗注入志愿者体内后,S蛋白基因指导合成的S蛋白作
抗原
抗原
。刺激机体产生能与之相结合的抗体,抗体的分泌量可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标,参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是 无
无
(填“有”或“无”)该病毒感染史。【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】逆转录;62;NcoⅠ;NheⅠ;自身不能合成蔗糖酶;抗原;无
【解答】
【点评】
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