植物受到重金属胁迫时,会造成其体内的活性氧代谢失调,积累过多的H2O2。为了探讨镉胁迫对菠菜体内过氧化氢酶活性的影响,科研人员用清水配制不同Cd2+浓度的处理溶液,每隔5d灌喷菠菜叶片,试验周期共50天,试验结束后收获菠菜进行过氧化氢酶活性测定,步骤如下:
a.取菠菜叶片鲜重2.5g,加入少量 pH 7.8的磷酸缓冲液,研磨成匀浆,转移至25mL容量瓶中,用①pH7.8的磷酸缓冲液pH7.8的磷酸缓冲液 洗研钵,并将冲洗液转入容量瓶中,用同一缓冲液定容离心取②上清液上清液(填“上清液”或“沉淀物”) 即为过氧化氢酶的粗提液。
b.取50mL三角瓶4个(2个测定,2 个对照),测定瓶中加入酶液2.5mL,对照瓶中加入③高温煮沸过的酶液高温煮沸过的酶液(填“清水”或“磷酸缓冲液”或“高温煮沸过的酶液”),再加入2.5mL 0.1mol•L-1 H2O2,同时计时,于30℃恒温水浴中保温10min,立即加入10% H2SO4 2.5mL。
c.用0.1mol•L-1 KMnO4标准溶液滴定H2O2,至出现粉红色(在30s内不消失)为终点。酶活性用每克鲜重样品1min内分解H2O2的毫克数表示。
d.计算不同Cd2+浓度胁迫下菠菜叶片的过氧化氢酶活性并绘制柱形图如图。

(1)菠菜细胞中每时每刻都进行着许多化学反应,称为 细胞代谢细胞代谢,过氧化氢酶能催化H2O2分解为 水和氧气(H2O和O2)水和氧气(H2O和O2)。
(2)请补全试验步骤①pH7.8的磷酸缓冲液pH7.8的磷酸缓冲液,②上清液上清液,③高温煮沸过的酶液高温煮沸过的酶液。
(3)实验步骤b中加入H2SO4的目的是 使H2O2酶失活,终止反应使H2O2酶失活,终止反应。温度设定为30℃进行恒温水浴的原因是 30℃是菠菜体内过氧化氢酶发挥催化作用的最适温度30℃是菠菜体内过氧化氢酶发挥催化作用的最适温度。
(4)随着镉浓度的增大,过氧化氢酶活性呈增高趋势,这种机制存在的意义是 植物对环境的适应,避免细胞受到H2O2毒害植物对环境的适应,避免细胞受到H2O2毒害。
【考点】探究影响酶活性的条件.
【答案】pH7.8的磷酸缓冲液;上清液;高温煮沸过的酶液;细胞代谢;水和氧气(H2O和O2);pH7.8的磷酸缓冲液;上清液;高温煮沸过的酶液;使H2O2酶失活,终止反应;30℃是菠菜体内过氧化氢酶发挥催化作用的最适温度;植物对环境的适应,避免细胞受到H2O2毒害
【解答】
【点评】
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