同源重组是指发生在两个DNA分子的同源序列（DNA序列相同或近似）之间直接进行交换的一种重组形式。利用同源重组的方法可以将目的基因插入到表达载体上，如图1所示。该操作可通过PCR技术在任一位点实现质粒的线性化，只要将目的基因两端带有与线性化质粒两端同源的DNA序列，在重组酶的作用下即可实现质粒上的同源重组，被称为体外重组。
（1）真核生物有性生殖过程中发生在 同源染色体非姐妹染色单体同源染色体非姐妹染色单体之间的基因重组，为体外同源重组提供了依据。图中B过程采用PCR技术扩增目的基因时，需要的正向引物和反向引物的序列中都由 线性化质粒两端同源的DNA序列和目的基因的部分序列线性化质粒两端同源的DNA序列和目的基因的部分序列两部分组成。
（2）通常采用双酶切法构建目的基因表达载体的优点是 保障目的基因和线性质粒的正确连接（防止目的基因、线性质粒的自身环化及目的基因与线性质粒的反接）保障目的基因和线性质粒的正确连接（防止目的基因、线性质粒的自身环化及目的基因与线性质粒的反接）。与双酶切法相比，同源重组法构建基因表达载体的突出优点是 在重组酶的作用下可以实现载体上任一点与目的基因的重组在重组酶的作用下可以实现载体上任一点与目的基因的重组。
（3）表达质粒线性化和目的基因扩增后电泳结果分别如图2甲、乙所示，将获得的目的基因与线性化质粒混合导入受体细胞中，不添加重组酶，该过程称为体内重组。为检测不同细胞的同源重组情况，一段时间后利用相应的引物对三个细胞（标号1、2、3）中DNA进行PCR扩增，电泳结果如图2丙所示。根据电泳结果可说明 1号、2号细胞未实现同源重组，3号细胞实现了同源重组1号、2号细胞未实现同源重组，3号细胞实现了同源重组。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】同源染色体非姐妹染色单体；线性化质粒两端同源的DNA序列和目的基因的部分序列；保障目的基因和线性质粒的正确连接（防止目的基因、线性质粒的自身环化及目的基因与线性质粒的反接）；在重组酶的作用下可以实现载体上任一点与目的基因的重组；1号、2号细胞未实现同源重组，3号细胞实现了同源重组
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：25引用：1难度：0.6
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
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（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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