I、当前新冠疫情仍在全球蔓延。疫苗的研制和快速准确的检测技术是应对疫情的有力措施。回答下列问题。
（1）腺病毒是研制疫苗的常用载体，图1是构建含新冠病毒S蛋白（抗原）基因的重组腺病毒表达载体示意图。
①以病毒作为基因工程的载体，其优点是可以利用病毒具有 侵染侵染的特点，易将目的基因导入受体细胞。图1中构建的腺病毒表达载体需含有S蛋白基因、标记基因、启动子、终止子启动子、终止子等组件。
②图1中四种限制酶的切割位点和识别序列如下表所示，构建腺病毒表达载体时需使用限制酶 NcoINcoI和 BamHIBamHI切割腺病毒基因和新冠病毒的S蛋白基因，选用这两种限制酶切割的主要原因是 防止自身环化及目的基因反向连接防止自身环化及目的基因反向连接（答出1点即可）。
| 限制酶 | NcoI | SphI | NheI | BamHI |
| 识别序列和切割位点 | C↓CATGGG | CATG↓C | G↓CTAGC | G↓GATCC |
逆转录酶
逆转录酶
酶，其中PCR过程需要 四种脱氧核糖核苷酸
四种脱氧核糖核苷酸
原料。II、为了定量测定样品中病毒核酸，常采用实时荧光PCR扩增技术，该技术扩增目的基因时，需额外添加荧光标记探针（每个目的基因结合1分子探针）。当探针完整时，不产生荧光，当探针被Taq酶水解时，R与Q分离，可检测到R发出的荧光，如图2所示。
（3）若样本中含有目的基因，引物和探针与目的基因通过形成
氢键
氢键
（化学键）特异性结合。据图2分析，探针的水解，发生在PCR过程 延伸
延伸
阶段。（4）在荧光定量PCR技术中，Ct值的含义是“每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数”，据此分析，当样本中初始模板越多，Ct值就
越小（越低）
越小（越低）
。（5）若每分子探针水解释放的R基团荧光强度为a,加入模板DNA数为b,则反应体系中荧光信号强度（Rn）与扩增次数（n）之间的关系为：Rn=
ab（2n-1）
ab（2n-1）
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】侵染；启动子、终止子；NcoI；BamHI；防止自身环化及目的基因反向连接；逆转录酶；四种脱氧核糖核苷酸；氢键；延伸；越小（越低）；ab（2n-1）
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：20引用：1难度：0.4
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
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（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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